一、克-雅病一例报告（论文文献综述）
王洁,牛婧雯,沙龙泽,孙鹤阳,褚姗姗,高晶[1]（2021）在《以失用症为突出表现的克雅病一例》文中指出分析1例2020年8月在中国医学科学院北京协和医院神经科住院的克雅病患者的临床表现和检查结果, 并对其进行全面的神经心理学评估和失用相关评估。该患者为65岁男性, 隐匿起病, 症状逐渐进展, 临床表现为失用症、快速进展的痴呆和锥体外系症状, 头颅磁共振成像提示双侧大脑半球"花边征", 脑脊液14-3-3蛋白阳性, 符合很可能克雅病的诊断标准, 其失用症为典型的观念运动性失用。经复习文献, 发现失用也可以是克雅病的主要神经心理损害表现, 临床诊治中需要重视失用症的规范和正确评价、及时识别。
林雪,甄祯,易芳,杨吉刚,关鸿志,石琦,刘磊,王佳伟,郭燕军[2]（2021）在《克-雅病18F-FDG PET影像学特点分析》文中进行了进一步梳理目的总结克-雅病患者18F-脱氧葡萄糖(18F-FDG)PET影像学特点。方法与结果共纳入2018年8月至2020年1月8例克-雅病患者（包括散发性克-雅病7例、遗传性克-雅病1例）,临床主要表现为快速进展性痴呆。DWI均存在皮质和（或）基底节区高信号（8/8例）;18F-FDG PET均呈单侧或双侧额顶颞叶葡萄糖低代谢（8/8例）,其次依次为枕叶（7/8例）、丘脑（5/8例）、基底节区（3/8例）、脑干（3/8例）和小脑（3/8例）低代谢。对比分析葡萄糖低代谢区域与相应DWI高信号区域,发现皮质50个葡萄糖低代谢区域中40个呈DWI高信号,尤以额叶的一致性较好;皮质下25个葡萄糖低代谢区域中仅9个呈DWI高信号,尤以基底节区的一致性较好;脑干和小脑仅呈现葡萄糖低代谢。结论克-雅病的诊断与鉴别诊断具有较高的敏感性,特别是病情进展迅速的患者,18F-FDG PET低代谢多提示病变部位神经功能严重缺损。对于快速进展性痴呆且伴明显锥体外系症状或小脑症状的患者,18F-FDG PET显示皮质低代谢而DWI未见明显高信号,应考虑克-雅病的诊断。
陈琼,毛剑[3]（2021）在《以快速进展的视力下降为首发症状的克雅病一例》文中提出65岁男性患者,双眼视力快速进行性下降,双眼同向性偏盲,1周后出现严重的认知障碍和肌阵挛。颅脑MRI示左侧颞叶和枕叶皮质高信号,呈现"飘带征"。脑脊液总Tau蛋白、14-3-3蛋白阳性。最终诊断:克雅病可能性大。2个月后经诊疗无效死亡。（眼科,2021,30:167-168）
陈朱云[4]（2020）在《美国《Emerging Infectious Diseases》2020年第8期有关人兽共患病论文摘译》文中研究指明P1710 1993-2018年德国医生散发性克雅病//Peter Hermann,Johannes Treig,Steffen Unkel,等通过分析1993-2005年德国克雅病监测组和2006-2016年国家人海绵状脑病参考中心记录的散发性克雅病（sCJD）患者的职业信息,了解德国医生sCJD患病情况。克雅病监测组和海绵状脑病参考中心登记的sCJD患者中职业为医生的分别有4人（0.32%,4/1 250）和13人（0.87%,13/1 491）。这些sCJD医生患者均不是神经科、神经外科、精神
高利萍[5]（2020）在《E200K突变朊病毒病的疾病特征及朊病毒感染过程中线粒体自噬的研究》文中研究说明朊病毒病,又称可传播性海绵状脑病（Transmissible spongiform encephalopathies,TSE）,它是一种罕见的、能够引起人类及多种动物脑组织海绵状病理改变的退行性疾病,潜伏期长,致死率为100%,可在同种动物之间进行传播。朊病毒病典型的神经病理学改变为脑组织中出现海绵状空泡样变性、淀粉样斑块沉积、神经元丢失和胶质细胞增生。其致病机制目前认为是由于机体正常的富含α螺旋的朊蛋白PrPC发生错误折叠形成了富含β折叠的PrPSc。自1730年首次报道羊瘙痒病以来,人及20多种动物均可患朊病毒病,其中人朊病毒病包括克-雅病、致死性家族型失眠症、库鲁病、吉斯特曼-施特劳斯综合征,动物朊病毒病最常见的为羊瘙痒病、牛的海绵状脑病。克-雅病依据其发病机理可分为散发型、家族型、医源型与变异型。本研究分两部分,第一部分为我国E200K突变遗传型朊病毒病患者的特征分析,主要针对我国30例E200K突变遗传型朊病毒病患者的遗传、家族、临床及实验室特征进行了分析。第二部分为Pinkl-Parkin通路介导的线粒体自噬在朊病毒感染过程中的研究,我们以感染朊病毒的细胞模型和动物模型脑组织样本为研究对象,在体外、体内两个层面证明,朊病毒感染可活化线粒体自噬系统。第一部分:我国E200K突变遗传型朊病毒病患者的特征分析E200K突变的遗传型克-雅病（gCJD）是世界范围内常见的突变类型之一。在本研究中,系统分析了我国30例E200K患者的流行病学、临床、实验室和遗传特征。这些患者来自12个不同的省份,大部分在我国北方。发病年龄范围为42-71岁,平均发病年龄为57岁。为了探究CYP4X1基因rs9793471多态性是否与遗传型克-雅病E200K的发病年龄有关,我们通过目的基因获得及序列测定发现,仅有1例患者CYP4X1基因rs9793471基因型为GA,其余为AA。本研究收集的病例患者男女比为11:19,病程为从2个月到26个月不等,平均为9个月。脑脊液（CSF）14-3-3阳性率为74%（20/27）,且在40-49岁及60-69岁人群中比率较高。头颅核磁共振（MRI）异常的比率为86.7%（26/30）,其中脑脊液14-3-3蛋白阳性病例中MRI异常率高达94%（17/18）。脑电图周期性三相波的比率为50%（13/26）。129位均为MM,219位为EE。我们对来自其中三个有家族史的21名家属进行了PRNP基因测序,结果显示16名为E200K携带者。以上研究表明,E200K在中国的遗传型克-雅病病例中具有相对较高的频率,并且其与散发型克-雅病有着相近的临床表现。本研究是目前国内最大规模的E200K遗传型克-雅病研究,将有助于人们对朊病毒病的全面、深入理解。第二部分:Pink1-Parkin通路介导的线粒体自噬在朊病毒感染过程中的研究线粒体自噬是清除细胞内受损线粒体的重要过程,线粒体的功能障碍与越来越多的神经退行性疾病直接相关。然而,朊病毒病中线粒体自噬仍然需要深入探索。在本研究中,我们通过透射电镜发现,在朊病毒感染的细胞系SMB-S15中有更多的自噬体、肿胀且嵴断裂的线粒体以及自噬体包裹的受损线粒体结构,同时发现了激活的自噬流的分子证据即p62表达量降低、LC3β Ⅱ表达量升高。Western blots结果显示,线粒体膜蛋白TIMM44、TOMM20和TIMM23水平降低,且LC3β与线粒体存在共定位,这说明朊病毒感染的SMB-S15细胞中线粒体自噬被激活。另外,Pinkl和Parkin表达水平升高,尤其是在线粒体组分;在SMB-S15细胞中,多聚泛素化蛋白的表达量降低,而磷酸化的多聚泛素化蛋白表达量升高,这表明Pink1被激活;SMB-S15细胞中MFN2表达水平下降,而其泛素化形式表达上调,这表明Parkin被激活。以上结果说明,Pink1-Parkin通路介导的线粒体自噬在朊病毒感染过程中发挥了重要作用。通过SiRNA干扰实验分别敲降SMB-S15细胞中Pink1和Parkin的表达,可降低自噬活性,但似乎不影响TOMM20和TIMM23的表达。此外,我们还通过Western blot和免疫组化实验检测发现,感染羊瘙痒因子小鼠适应株139A和ME7的小鼠脑组织中Pink1和Parkin水平在疾病终末期显着升高。免疫荧光分析显示感染羊瘙痒因子的小鼠脑组织中,Pink1信号与GFAP、Iba1和NeuN阳性细胞存在共定位。IHC检测了感染了 139A和ME7的脑组织的连续切片,发现更多的Pink1和Parkin阳性细胞位于PrPSc沉积较多的区域。这些结果表明,在朊病毒感染的细胞和朊病毒感染的实验小鼠模型中,通过增强的Pink1-Parkin通路激活了线粒体自噬,这也可能是导致神经元细胞坏死的原因之一。
陈嘉[6]（2020）在《朊病毒感染脑组织低丰度细胞因子筛选及其与朊病毒病相关性初探》文中研究表明朊病毒感染后可观察到中枢神经系统炎症细胞的活化和多种细胞因子的含量升高,但一些低丰度和不常见的细胞因子却鲜有报道。为了评估朊病毒感染过程中罕见细胞因子的潜在变化,我们利用Luminex方法分析筛选了感染不同羊瘙痒因子的小鼠脑组织17种细胞因子的含量。结果发现干扰素诱导的蛋白10（IP10）、角质形成细胞趋化因子（KC）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）在朊病毒感染小鼠脑组织中含量上调,随后利用三种细胞因子的商品化ELISA试剂盒和特异性免疫组织化学方法进行了验证。通过特异性荧光定量PCR方法检测IP10、M-CSF和KC,发现三种细胞因子在朊病毒感染小鼠终末期脑组织中的转录水平异常升高,应用数字PCR技术确认了IP10在多种羊瘙痒因子感染小鼠脑组织中转录水平上调。对朊病毒感染后不同时间点采集的脑组织进行动态分析发现,三种细胞因子的含量随病程呈时间依赖性增加,在感染终末期动物脑组织中IP10含量的增加尤为明显。此外,研究发现45例散发型克-雅病患者脑脊液中IP10的含量虽然组内差异较大,但整体明显高于非朊病毒病患者。为揭示IP10与朊病毒病之间的关系及其在中枢神经系统的分布规律,我们利用IP10特异性免疫组织荧光方法对羊瘙痒因子139A和ME7感染小鼠终末期的脑组织切片进行比较分析,发现在朊病毒感染的皮层、海马和丘脑中,IP10与神经元和小胶质细胞的标志物存在共定位,而与星形胶质细胞的标志物不存在共定位;利用CXCR3特异性免疫蛋白印迹、细胞免疫荧光、RT-PCR方法,证实IP10的主要受体CXCR3在朊病毒感染小鼠终末期脑组织中蛋白及转录水平异常升高;特异性免疫组织化学研究发现CXCR3主要分布于朊病毒感染的海马、皮层、丘脑及小脑等四个脑区的细胞浆中,尤其在丘脑分布更为明显,且CXCR3的颗粒样沉积会出现在脑组织空泡的周围;特别是对朊病毒感染小鼠脑组织连续切片进行IP10、CXCR3与PrPSc特异性免疫组织化学分析,结果发现在朊病毒感染海马、皮层、丘脑及小脑四个脑区的相同位置均可观察到PrPSc、IP10、CXCR3三者共同的阳性信号,提示CXCR3-IP10与PrPSc斑块形成具有明显关联性。在本研究中首次发现了M-CSF作为重要细胞因子在朊病毒感染中枢神经系统的显着变化,丰富了IP10和KC在朊病毒感染中枢神经系统中含量变化特征,同时初步探究了CXCR3-IP10与朊病毒感染的相关性,进一步明确CXCR3-IP10与朊病毒病理形成的因果关系,为丰富朊病毒病致病机制提供可信证据。
刘恋[7]（2020）在《朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白含量变化的研究》文中进行了进一步梳理朊病毒病是一类潜伏期长,可影响多种哺乳动物包括人类的神经退行性疾病,死亡率为100%。Tau蛋白作为一种胞内微管相关蛋白,在多种神经退行性疾病患者脑脊液中显着升高。近年来研究显示神经细胞和非神经细胞能够特异性分泌tau蛋白。这些研究提示患有神经退行性疾病后,细胞可能存在tau蛋白的非常规分泌。但在朊病毒疾病中tau蛋白的分泌情况还未有报道。为了探究朊病毒感染后总tau蛋白的分泌情况,利用朊病毒感染的SMB-S15细胞和其对照细胞系SMB-PS,通过ELISA和Western blot方法检测了细胞裂解液和培养液中总tau蛋白含量。ELISA结果显示与SMB-PS细胞相比,SMB-S15细胞培养液中总tau蛋白含量显着升高。Western blot结果显示与SMB-PS相比,SMB-S15细胞裂解液中总tau蛋白含量显着升高;SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中均存在总tau蛋白阳性条带,经与裂解液中总tau蛋白归一化后,SMB-S15细胞培养液中总tau蛋白含量显着高于SMB-PS细胞,再次印证ELISA结果。本研究自行制备了四支抗tau蛋白外显子2和10的单克隆抗体（anti-tE2/10）,并在与抗原结合能力、种属反应性、对朊病毒模型的适应性方面对其进行验证。本研究将制备的单抗应用到ELISA方法中,检测了SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中相应tau异构体的含量。结果显示SMB-PS和SMB-S15细胞均能够分泌E2/E10-tau,但是含量均无明显差异。为了探究磷酸化对朊病毒感染的神经细胞分泌tau蛋白能力的影响,通过Western blot实验检测了SMB-PS和SMB-S15细胞培养液中Thr181、Thr205、Ser396和Ser404位磷酸化的tau蛋白（pT181/pT205/pS396/pS404-tau）水平。结果显示pT205/pS396-tau在SMB-PS和SMB-S15细胞中均有分泌,SMB-S15细胞分泌量显着高于SMB-PS细胞;而pT181/pS404-tau不会被分泌到细胞间隙。为了进一步说明tau蛋白分泌与朊病毒复制密切相关,通过ELISA和Western blot技术检测了经白藜芦醇处理7 d彻底消除SMB-S15细胞中的PrPSc后获得的SMB-RES细胞的培养液中总tau蛋白、pT205/pS396-tau含量。结果显示朊病毒清除后,SMB-RES细胞分泌总tau蛋白、pT205/pS396-tau的能力较SMB-S15细胞有所恢复。本研究证明了朊病毒感染后,神经细胞分泌tau蛋白的能力增加。朊病毒的清除能够逆转这种现象。此外tau蛋白外显子2和10的存在可能不是影响朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白的主要因素,而tau蛋白在不同位点的磷酸化是这一过程的关键影响因素。这些结果有助于解释朊病毒病患者脑脊液中tau蛋白升高的原因,并为理解朊病毒病的作用机理提供理论基础。本研究制备的抗tau蛋白外显子2和10的单克隆抗体特异性高、与抗原结合能力强、适用范围广,将成为了解不同tau蛋白异构体在神经退行性疾病中的作用的有力工具。
黄欣莹[8]（2020）在《脑脊液标志物在散发型克雅氏病诊断的作用》文中研究表明目的:探索脑脊液标志物对散发性克雅氏病（Sporadic Creutzfeldt-Jakob disease,sCJD）的诊断与鉴别诊断作用。方法:选取2018-2019年“北京协和医院脑脊液生物标志物研究队列”中的sCJD患者。同时选择年龄性别相对匹配的阿尔茨海默（Alzheimer’s disease,AD）患者以及认知功能正常的其他神经系统疾病患者作为疾病对照及正常,所有脑脊液按标准化流程采集、保存,由专门实验室及指定实验员进行β淀粉样蛋白（Aβ）、总-tau蛋白（T-tau）、磷酸化tau蛋白（P-tau）测定,对比三组人群脑脊液标志物水平的差异。同时收集sCJD患者临床资料,并按规定报送中国疾病防治中心,检测14-3-3蛋白及相关的基因。结果:共收集12例sCJD患者、49例AD患者以及14名认知正常者入组。通过非参数秩和检验对比三组人群脑脊液标志物水平,我们发现sCJD组T-tau水平达1211（448,2 227）pg/ml,AD组T-tau水平达549（314,1 078）pg/ml,均显着高于对照组（T-tau水平为127.1（79.1,192）pg/ml）,sCJD组的T-tau蛋白水平升高更明显,显着高于AD患者（P=0.0349,U=178）。在AD患者中,A β水平481.2（599,753.6）pg/ml,较对照组明显下降,而CJD组Aβ无明显改变;AD组P-tau水平达72.41（57.7,108.9）pg/ml,较对照组显着升高（P<0.01,U=82）,但在sCJD患者为31.63（24,47.44）pg/ml无明显升高。sCJD患者的T-tau/P-tau比率（29.77（20.01,54.53））高于AD（7.446（4.793,10.43））（P<0.01,U=87）。12例sCJD头核磁均存在“花边征”,5例存在脑电图三相波改变。9例sCJD上报中国疾病防治中心,其中4例脑脊液14-3-3蛋白阳性;9例血液得朊蛋白PRNP基因均无突变。结论:sCJD患者脑脊液Tau蛋白、T-tau/P-tau显着增高,对于sCJD的诊断及鉴别具有一定价值。
李青,史永林[9]（2020）在《2009-2018年安徽省克-雅病病例监测特征分析》文中研究表明目的分析2009-2018年安徽省克-雅病（Creutzfeldt-Jackob Disease,CJD）病例流行病学、临床特征、以及病例转归情况。方法结合病例脑脊液、血液标本的实验室检测结果,对安徽省克-雅病监测的疑似病例的流行病学、临床特征以及随访资料进行分析。结果 2009-2018年安徽省报告的29例CJD病例中临床诊断CJD病例17例,疑似病例CJD病例9例,遗传或家族型CJD病例3例。病例报告无季节聚集性,长久居住地呈散在分布,职业分布广泛。临床资料分析,进行性痴呆为最常见的首发症状,占全部的65.52%（19/29）;散发型CJD临床诊断病例发病年龄中位数为61.11岁,男女比例1.23∶1,均是汉族。辅助检查以头颅核磁共振（MRI）异常为主（80.00%）。实验室检测脑脊液14-3-3蛋白阳性10例,阳性率37.93%;血标本中PRNP检测129位氨基酸多态性均为M/M型;PRNP基因检测与遗传型相关的基因突变有3例,基因突变位点T188K、D178N和R208H各1例。结论 2009-2018年安徽省CJD病例流行病学特征与同期全国监测情况相符合。首次在安徽发现第一例以R208H为基因突变位少见的遗传型CJD病例。
梁娜,王梁,刘亚玲,张海波,赵文艳,任博文[10]（2020）在《散发性克雅病17例临床分析》文中研究表明背景散发性克雅病（sCJD）临床罕见,早期临床表现多变,临床诊断困难,需要结合辅助检查进一步明确。目的分析17例临床可能或很可能sCJD患者的临床特点及辅助检查结果,为sCJD早期临床诊断提供参考。方法检索河北医科大学第二医院病案室2014年11月—2018年8月出院诊断为临床可能或很可能sCJD患者的住院病历。收集患者一般资料（性别、年龄、民族、出院诊断、首发症状、主要临床表现）、辅助检查〔颅脑MRI、脑电图（EEG）、脑脊液14-3-3蛋白、血清朊蛋白基因（PRNP）、自身免疫性相关的快速进展性痴呆的抗体检查（血清及脑脊液非副肿瘤自身免疫性脑炎相关抗体检查、副肿瘤相关抗体检查）〕结果。对患者进行电话随访,记录患者死亡情况、总病程。结果共纳入17例患者,平均年龄（61.8±6.2）岁,均为汉族;出院诊断为很可能sCJD 16例（94.1%）,可能sCJD 1例（5.9%）;首发症状主要为记忆力下降（41.2%）、头晕（29.4%）、精神行为异常（17.6%）;主要临床表现为认知下降（82.4%）、锥体束/锥体外系损害（47.1%）。16例患者颅脑弥散加权成像（DWI）均出现脑皮质和/或基底核异常高信号,相应表观扩散系数（ADC）低信号。皮质至少2处脑叶沿脑表面脑回状异常高信号,呈"花边征"或"绸带征",基底核包括单/双侧尾状核、壳核等。1例患者行磁共振波谱成像（MRS）检查,影像学表现为N-乙酰天冬氨酸（NAA）峰降低。16例患者行EEG检查,其中基本节律减慢15例,周期性尖慢复合波（PSWCs） 4例,三相波5例,基本节律减慢背景上的非周期性的癫痫样异常放电4例。8例患者行脑脊液14-3-3蛋白检查,阳性3例。8例患者行PRNP检查,均为:（1）与标准序列比对,序列未出现突变（标准序列号NCBI:NM-183079.1）;（2）129位氨基酸多态性为M/M型;（3）219位氨基酸多态性为E/E型。11例患者行血清及脑脊液非副肿瘤自身免疫性脑炎相关抗体检查,均为阴性。9例患者行血清及脑脊液副肿瘤相关抗体检查,均为阴性。17例患者全部进行电话随访,其中11例患者电话随访时已经死亡,总病程1.5～16.0个月、平均（7.4±4.7）个月,1年内死亡率为81.8%（9/11）;2例患者电话空号;2例患者家属拒绝随访;1例患者家属不配合随访,患者已死亡,死亡时间不详,但其总病程<14个月;1例患者仍存活,至2019-02-01病程已达14.0个月。11例死亡患者中,发展至无动性缄默状态9例,因压疮感染而死亡2例;10例行颅脑DWI检查（其中7例患者基底核及皮质均有异常信号,总病程中位数为11.0个月;3例患者仅脑皮质有异常高信号,总病程中位数为4.0个月）。结论 sCJD是由朊蛋白感染的快速进展的、致命的神经变性病。当临床表现为记忆力下降、视觉异常等时,应行颅脑MRI、EEG、脑脊液14-3-3蛋白、实时震动诱导转换（RT-QuIC）检查明确临床诊断;出现颅脑MRI孤立皮质受累、14-3-3蛋白阳性时病情进展较快;出现EEG非周期性的癫痫样异常放电、特征性的三相波及PSWCs时,应密切关注患者疾病进展。
二、克-雅病一例报告（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、克-雅病一例报告（论文提纲范文）
（2）克-雅病18F-FDG PET影像学特点分析（论文提纲范文）
| 临床资料 |
| 一、病例选择标准 |
| 1. 诊断标准 |
| 2. 纳入与排除标准 |
| 二、临床特点 |
| 1. 首发症状 |
| 2. 临床症状与体征 |
| 3. 辅助检查 |
| 三、影像学特点 |
| 1. MRI |
| 2.18F-FDG PET |
| 3.18F-FDG PET与DWI对比分析 |
| 四、治疗与转归 |
| 讨论 |
（5）E200K突变朊病毒病的疾病特征及朊病毒感染过程中线粒体自噬的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 前言 |
| 1 朊病毒病概述 |
| 1.1 朊病毒病 |
| 1.1.1 遗传型朊病毒病 |
| 1.1.2 遗传型克-雅病E200K |
| 1.2 朊病毒病的诊断和检测方法 |
| 1.3 朊蛋白的生物学特性 |
| 1.3.1 细胞型朊蛋白PrP~C |
| 1.3.2 异常朊蛋白PrP~(Sc) |
| 1.3.3 PrP~(Sc)的形成、复制与聚集 |
| 2 线粒体自噬及其相关的调节机制 |
| 2.1 线粒体自噬的概念 |
| 2.2 线粒体自噬相关的的分子机制 |
| 2.2.1 酵母中的线粒体自噬 |
| 2.2.2 Pink1-Parkin通路介导的线粒体自噬 |
| 2.2.3 相关自噬受体介导的线粒体自噬 |
| 3 线粒体自噬与朊病毒及朊病毒病 |
| 第一部分 我国E200K突变遗传型朊病毒病患者的特征分析 |
| 1 引言 |
| 2 主要的仪器与材料 |
| 2.1 主要的设备与仪器 |
| 2.2 主要的试剂与牦材 |
| 2.3 主要溶液的配制 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 全国克-雅病监测体系 |
| 3.2 病例的诊断与确定 |
| 3.3 样品的采集 |
| 3.4 脑脊液中14-3-3蛋白的检测 |
| 3.5 血液中PRNP基因129位及219位氨基酸多态性的测定 |
| 3.6 脑组织中PrP~(Sc)的Western blot检测 |
| 3.7 血液CYP4X1基因多态性的检测 |
| 4 随访 |
| 5 统计学分析 |
| 6 实验结果 |
| 6.1 流行病学特征 |
| 6.2 临床特征 |
| 6.3 临床实验室检测特点 |
| 6.4 生存时间 |
| 6.5 PRNP及CYP4X1基因序列的测定与家族史 |
| 7 讨论 |
| 8 小结 |
| 第二部分 在朊病毒感染过程中Pink1-Parkin通路介导的线粒体自噬的研究 |
| 1 引言 |
| 2 实验仪器和材料 |
| 2.1 朊病毒毒株模型 |
| 2.2 主要仪器与设备 |
| 2.3 主要的试剂及耗材 |
| 2.3.1 细胞培养相关的主要试剂及耗材 |
| 2.3.2 细胞超薄切片的制备所需的试剂及耗材 |
| 2.3.3 免疫印迹相关试剂及耗材 |
| 2.3.4 实时定量聚合酶链式反应所用到的试剂及耗材 |
| 2.3.5 免疫组织化学、免疫焚光相关试剂及耗材 |
| 2.3.6 其它相关试剂及耗材 |
| 2.3.7 常用缓冲液及溶液的配制 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 细胞培养 |
| 3.2 细胞超薄切片的制备及电子显微镜的观察 |
| 3.3 免疫沉淀(IP) |
| 3.4 脑组织匀浆的制备 |
| 3.5 蛋白免疫印迹(Western Blot) |
| 3.6 SMB-S15及SMB-PS细胞总RNA的提取 |
| 3.7 单链cDNA的合成 |
| 3.8 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR) |
| 3.9 免疫组织化学(IHC)实验 |
| 3.10 组织免疫荧光实验(IFA) |
| 3.11 细胞线粒体及胞质蛋白的提取 |
| 3.12 细胞瞬时转染 |
| 3.13 统计学分析 |
| 4 结果 |
| 4.1 朊病毒感染细胞系SMB-S15的线粒体形态异常 |
| 4.2 朊病毒感染的细胞系SMB-S15中存在明显的自噬现象 |
| 4.3 朊病毒感染的SMB-S15细胞中Pink1、Parkin水平升高 |
| 4.4 多聚泛素化蛋白在朊病毒感染SMB-S15细胞中减少,而磷酸泛素化蛋白增加 |
| 4.5 朊病毒感染的SMB-S15细胞中MFN2蛋白减少而其泛素化形式增加 |
| 4.6 敲降SMB-S15细胞中Pink1和Parkin的表达,能部分抑制线粒体自噬 |
| 4.7 在139A和ME7感染的小鼠脑组织中Pink1和Parkin表达增加 |
| 4.8 Pink1在感染139A及ME7的小鼠脑组织中与GFAP、Iba1和Neun存在共定位 |
| 4.9 Pink1和Parkin在感染139A及ME7的小鼠脑组织中主要分布于PrP~(Sc)沉积区 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 线粒体自噬与神经退行性疾病 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（6）朊病毒感染脑组织低丰度细胞因子筛选及其与朊病毒病相关性初探（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 朊病毒及朊病毒病 |
| 1.1.1 朊病毒概述 |
| 1.1.2 朊病毒病概述 |
| 1.1.3 朊病毒相关细胞因子 |
| 1.2 趋化因子CXCL10及其受体CXCR3 |
| 1.2.1 趋化因子 |
| 1.2.2 CXCL10/CXCR3概述 |
| 1.3 研究目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 朊病毒模型 |
| 2.1.2 主要设备及仪器 |
| 2.1.3 实验试剂及耗材 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 SMB细胞系培养 |
| 2.2.2 细胞裂解液的制备 |
| 2.2.3 脑组织匀浆的制备 |
| 2.2.4 脑组织蜡块的制备 |
| 2.2.5 RNA提取 |
| 2.2.6 设计引物 |
| 2.2.7 实时定量PCR |
| 2.2.8 数字PCR |
| 2.2.9 免疫印迹 |
| 2.2.10 免疫组织化学 |
| 2.2.11 免疫荧光 |
| 2.2.12 酶联免疫吸附 |
| 2.2.13 Luminex多重细胞因子检测 |
| 2.2.14 蛋白浓度测定 |
| 2.2.15 统计学分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 朊病毒感染啮齿动物脑组织中IP10、KC、M-CSF变化特征 |
| 3.1.1 朊病毒感染啮齿动物脑组织中天然免疫因子变化特征 |
| 3.1.2 朊病毒感染啮齿动物终末期脑组织中IP10、KC、M-CSF含量升高 |
| 3.1.3 朊病毒感染啮齿动物终末期脑组织中IP10、KC、M-CSF转录上调 |
| 3.1.4 朊病毒感染啮齿动物终末期脑组织中IP10、KC、M-CSF的分布特征 |
| 3.1.5 朊病毒感染过程中脑组织IP10、KC、M-CSF的动态表达水平 |
| 3.1.6 朊病毒患者脑脊液中IP10含量升高 |
| 3.2 朊病毒感染中IP10-CXCR3信号通路的特征性变化 |
| 3.2.1 朊病毒感染脑组织IP10与神经细胞的关系 |
| 3.2.2 CXCR3在朊病毒感染动物脑组织和细胞中的表达特征 |
| 3.2.3 朊病毒感染动物和细胞模型中CXCR3的转录特征 |
| 3.2.4 朊病毒感染动物脑组织中CXCR3的分布 |
| 3.2.5 CXCR3-IP10与PrPSc沉积的相关性 |
| 4 讨论 |
| 4.1 多种朊病毒感染动物模型脑组织中CXCL10、KC、M-CSF变化情况 |
| 4.2 CXCL10-CXCR3在朊病毒感染中的特征性变化 |
| 5 结论 |
| 5.1 筛选出朊病毒感染脑组织罕见细胞因子IP10、KC、M-CSF |
| 5.2 阐明朊病毒感染脑组织IP10/CXCR3与朊病毒病相关性 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白含量变化的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 朊病毒病 |
| 1.1.1 背景 |
| 1.1.2 朊病毒病诊断 |
| 1.2 朊病毒 |
| 1.2.1 朊病毒学说 |
| 1.2.2 朊蛋白(PrP) |
| 1.2.3 PrPC转变为PrPSc的作用机制 |
| 1.3 Tau蛋白 |
| 1.3.1 Tau基因和异构体 |
| 1.3.2 Tau蛋白是神经退行性疾病的生物标志物 |
| 1.3.3 Tau蛋白磷酸化修饰 |
| 1.3.4 Tau蛋白分泌 |
| 1.4 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 朊病毒感染细胞和动物模型 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 |
| 2.1.3 细胞培养耗材及试剂 |
| 2.1.4 免疫印迹耗材及试剂 |
| 2.1.5 细胞免疫荧光和组织免疫化学耗材及试剂 |
| 2.1.6 抗体 |
| 2.1.7 其他耗材及试剂 |
| 2.1.8 常用试剂的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 脑组织匀浆制备 |
| 2.2.3 乳酸脱氢酶(LDH)释放率测定 |
| 2.2.4 细胞培养液及细胞裂解液制备 |
| 2.2.5 免疫印迹(Western blot)及考马斯亮蓝染色 |
| 2.2.6 酶联免疫吸附实验(ELISA) |
| 2.2.7 细胞免疫荧光 |
| 2.2.8 免疫组织化学 |
| 2.2.9 生物膜干涉分析 |
| 2.2.10 统计学分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 SMB-PS和 SMB-S15 细胞系的鉴定 |
| 3.2 朊病毒感染后神经细胞分泌总tau蛋白的能力 |
| 3.2.1 SMB-PS和 SMB-S15 细胞的LDH动态释放率 |
| 3.2.2 SMB-PS和 SMB-S15 细胞培养液中总tau蛋白含量测定 |
| 3.3 朊病毒感染前后神经细胞分泌不同tau异构体的能力 |
| 3.3.1 人tau蛋白外显子2和10 单克隆抗体的制备 |
| 3.3.2 单克隆抗体与抗原结合能力的动力学检测 |
| 3.3.3 单克隆抗体的种属反应性检测 |
| 3.3.4 制备的单克隆抗体对朊病毒细胞和动物模型的适应性 |
| 3.3.5 制备的单克隆抗体ELISA实验条件的摸索及验证 |
| 3.3.6 朊病毒感染后神经细胞分泌E2-tau和 E10-tau的能力差异 |
| 3.4 不同位点的磷酸化对朊病毒感染的神经细胞分泌tau蛋白的影响 |
| 3.4.1 SMB-PS 和 SMB-S15 细胞培养液中 Ser396 和 Thr205 位磷酸化的 tau 蛋白含量测定 |
| 3.4.2 SMB-PS 和 SMB-S15 细胞培养液中 Ser404 和 Thr181 位磷酸化的 tau 蛋白含量测定 |
| 3.5 白藜芦醇清除PrPSc后对SMB-S15 细胞分泌tau蛋白的影响 |
| 3.5.1 白藜芦醇清除PrPSc后对神经细胞分总tau蛋白的影响 |
| 3.5.2 白藜芦醇清除PrPSc后对神经细胞分泌Ser396和Thr205 位磷酸化的tau蛋白的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）脑脊液标志物在散发型克雅氏病诊断的作用（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 一、立题依据 |
| 二、国内外研究进展 |
| 三、研究目标 |
| 资料和方法 |
| 一、研究对象 |
| 二、研究方法 |
| 三、统计学方法 |
| 结果 |
| 一、临床资料 |
| 二、MRI以及脑电图结果 |
| 三、脑脊液检查及标志物 |
| 四、基因检测结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 sCJD的脑脊液标志物研究 |
| 背景 |
| 14-3-3蛋白和Tau |
| 其他脑脊液标志物 |
| 新希望 |
| 脑脊液标志物与sCJD病理、分子亚型 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）2009-2018年安徽省克-雅病病例监测特征分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 样品采集及检测 |
| 1.3.1 样品采集 |
| 1.3.2 标本检测 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结 果 |
| 2.1 发病概况 |
| 2.2 流行病学特征 |
| 2.3 临床表现 |
| 2.4 辅助检查 |
| 2.4.1 影像学检查 |
| 2.4.2 脑电图检查 |
| 2.4.3 PRNP基因检测 |
| 2.5 随访及转归 |
| 3 讨 论 |
（10）散发性克雅病17例临床分析（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.2.1 资料收集 |
| 1.2.2 随访 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 辅助检查结果 |
| 2.2.1 颅脑MRI检查 |
| 2.2.2 EEG检查 |
| 2.2.3 脑脊液14-3-3蛋白检查 |
| 2.2.4 PRNP检查 |
| 2.2.5 自身免疫性相关的快速进展性痴呆的抗体检查 |
| 2.3 随访结果 |
| 3 讨论 |
四、克-雅病一例报告（论文参考文献）
- [1]以失用症为突出表现的克雅病一例[J]. 王洁,牛婧雯,沙龙泽,孙鹤阳,褚姗姗,高晶. 中华神经科杂志, 2021(11)
- [2]克-雅病18F-FDG PET影像学特点分析[J]. 林雪,甄祯,易芳,杨吉刚,关鸿志,石琦,刘磊,王佳伟,郭燕军. 中国现代神经疾病杂志, 2021(05)
- [3]以快速进展的视力下降为首发症状的克雅病一例[J]. 陈琼,毛剑. 眼科, 2021(02)
- [4]美国《Emerging Infectious Diseases》2020年第8期有关人兽共患病论文摘译[J]. 陈朱云. 中国人兽共患病学报, 2020(10)
- [5]E200K突变朊病毒病的疾病特征及朊病毒感染过程中线粒体自噬的研究[D]. 高利萍. 中国疾病预防控制中心, 2020
- [6]朊病毒感染脑组织低丰度细胞因子筛选及其与朊病毒病相关性初探[D]. 陈嘉. 黑龙江八一农垦大学, 2020(08)
- [7]朊病毒感染后神经细胞分泌tau蛋白含量变化的研究[D]. 刘恋. 黑龙江八一农垦大学, 2020(09)
- [8]脑脊液标志物在散发型克雅氏病诊断的作用[D]. 黄欣莹. 北京协和医学院, 2020(05)
- [9]2009-2018年安徽省克-雅病病例监测特征分析[J]. 李青,史永林. 中国人兽共患病学报, 2020(02)
- [10]散发性克雅病17例临床分析[J]. 梁娜,王梁,刘亚玲,张海波,赵文艳,任博文. 中国全科医学, 2020(27)