一、心肌缺血时血小板功能变化的机制(英文)（论文文献综述）
李晨[1]（2021）在《电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及FXR/SHP通路的调控作用》文中提出目的 基于“中医治未病”思想及“心胸内关谋”经典理论,在前期研究基础上,以心肌缺血再灌注损伤模型大鼠为研究对象,从细胞凋亡、细胞焦亡以及细胞自噬的角度出发,观察电针“内关”“足三里”“关元”穴预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及其作用机制。并借用FXR/SHP凋亡信号通路激动剂GW4064及抑制剂Z-guggulsterone从FXR/SHP信号转导通路的角度探讨其作用机制,以及细胞凋亡、焦亡和自噬的联系,为电针预处理防治MIRI提供新的理论依据和治疗靶点。方法 一理论探讨:以中医学和现代医学理论为基础,从心肌细胞焦亡、自噬及凋亡角度出发,探讨电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及其机制;从FXR/SHP凋亡信号通路的角度出发,探讨FXR/SHP通路对心肌细胞凋亡、焦亡以及自噬的影响及其作用机制,以及三者间的联系。二动物实验:将Wistar大鼠80只（雄性,SPF级）按照“随机数字表法”进行随机分组,平均分为4组,分别是:正常组（N组）、假手术组（S组）、模型组（M组）和电针预处理组（EA组）,20只为一组。所有实验动物适应性喂养1周后,开始正式实验。通过左侧冠状动脉结扎法制备MIRI大鼠模型,每组大鼠给予相应的干预措施。再增加40只Wistar大鼠（雄性,SPF级）,随机分为2组,每组20只,分别为电针+GW4064激动剂组（EA+GW组）和电针+z-Guggulsterone抑制剂组（EA+Z组）,每组大鼠给予相应的干预措施。实验1:采用HE染色观察各组心肌组织的形态结构;采用TTC染色测量各组心肌梗死面积和心肌梗死质量;采用TUNEL染色计算各组心肌细胞凋亡指数,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（ELISA法）进行各组心肌损伤标志物（LDH、CK和c Tn I）的测定;从而探讨电针预处理对MIRI大鼠的保护作用。实验2:采用Western-blot法检测各组NLRP3、ASC、Caspase-1、Gasdermin D蛋白等焦亡相关指标的表达,初步探讨电针预处理对MIRI大鼠心肌细胞焦亡通路的调节作用实验3:采用Western-blot法检测各组Beclin1、LC3I、LC3Ⅱ蛋白表达以及LC3Ⅱ/LC3I比值,研究电针预处理对心肌细胞的保护作用,初步探讨电针预处理对MIRI大鼠心肌细胞自噬通路的调节作用。实验4:采用Western-blot法检测各组Bcl-2、Bax蛋白表达,同时用荧光定量PCR法检测各组Caspases-9m RNA、Caspases-3m RNA表达,研究电针预处理对MIRI大鼠模型的保护作用,初步探讨电针预处理对MIRI大鼠心肌细胞凋亡通路的调节作用。实验5:采用TUNEL染色法计算各组心肌细胞凋亡指数,采用荧光定量PCR法检测凋亡相关指标FXRm RNA、SHPm RNA表达,采用Western-blot法检测各组凋亡相关指标Bcl-2、Bax、Caspase3蛋白表达,焦亡相关指标Gasdermin D、IL-1β、IL-18蛋白表达以及自噬相关指标Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,探讨电针预处理对MIRI模型大鼠FXR/SHP信号通路的影响,以及FXR/SHP信号通路对细胞凋亡、焦亡、自噬的影响及三者间的联系。结果 实验1电针预处理对MIRI大鼠心肌损伤标志物、心肌细胞凋亡指数及形态学影响（1）HE染色:光镜下观察与比较各组大鼠心肌细胞形态学结果如下:N组和S组大鼠心肌纤维走向整齐,横纹清晰可见,细胞结构完整,形态正常,无炎性浸润,细胞核位置正常,无空泡样变性;M组心肌纤维走形紊乱、可见心肌纤维断裂现象,心肌细胞结构不完整,炎性细胞浸润明显,可见空泡样变性;EA组大鼠心肌组织大体形态正常,破坏减轻,心肌纤维排列稍显杂乱,少许纤维断裂,少量炎性细胞浸润,少量细胞水肿坏死。表明电针预处理能有效缓解心肌缺血再灌注模型大鼠心肌组织损伤。N组和S组大鼠心肌纤维走向整齐,横纹清晰可见,细胞结构完整,形态正常,无炎性浸润,细胞核位置正常,无空泡样变性;M组心肌纤维走形紊乱、可见心肌纤维断裂现象,心肌细胞结构不完整,炎性细胞浸润明显,可见空泡样变性;EA组大鼠心肌组织大体形态正常,破坏减轻,心肌纤维排列稍显杂乱,少许纤维断裂,少量炎性细胞浸润,少量细胞水肿坏死。表明电针预处理能有效缓解心肌缺血再灌注模型大鼠心肌组织损伤。（2）心肌梗死面积:与N组相比较,S组梗死面积变化不大,差异无统计学意义（P>0.05）;与N组相比较,M组的梗死面积显着增加（P<0.01）;与M组相比较,EA组的梗死面积显着减小（P<0.01）。（3）心肌梗死质量;与N组相比较,S组梗死质量变化不大,差异无统计学意义（P>0.05）;与N组相比较,M组的梗死质量显着增加（P<0.01）;与M组相比较,EA组的梗死质量显着减小（P<0.01）。（4）心肌细胞凋亡指数:N组和S组心肌组织中,可见极少量凋亡细胞核,M组中存在大量凋亡细胞,细胞核形态不规则,成碎片状,EA组可见少量凋亡细胞核。与N组和S组比较,M组心肌细胞凋亡指数明显上升（P<0.01）,与M组比较,EA组心肌细胞凋亡指数明显下降（P<0.01）。（5）血清LDH、CK、c Tn I含量:与N组相比较,S组血清LDH、CK、c Tn I含量变化不大,差异均无统计学意义（均P>0.05）;与N组比较,M组、EA组血清LDH、CK、c Tn I含量均上调（均P<0.01）,EA组血清LDH、CK、c Tn I含量均低于M组（均P<0.01）。实验2电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠焦亡通路的调控作用（1）心肌组织NLRP3、ASC蛋白表达情况:与N组、S组相比较,M组、EA组的NLRP3、ASC蛋白表达均升高（均P<0.05）,与M组比较,EA组NLRP3、ASC蛋白表达均显着下降（均P<0.05）。（2）心肌组织Caspase-1、Gasdermin D蛋白表达情况:与N组、S组相比较,M组、EA组的Caspase-1、Gasdermin D蛋白表达均升高（均P<0.05）,与M组比较,EA组Caspase-1、Gasdermin D蛋白表达均显着下降（均P<0.05）。实验3电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠自噬通路的调控作用（1）心肌组织Beclin-1蛋白表达情况:与N组、S组比较,M组、EA组Beclin-1蛋白表达明显升高（P<0.05）,与M组相比,EA组Beclin-1蛋白表达明显降低（P<0.05）。（2）心肌组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值情况:与N组、S组比较,M组、EA组LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显升高（均P<0.05）,与M组相比,EA组LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显降低（P<0.05）。实验4电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠细胞凋亡的影响（1）心肌组织Bcl-2蛋白表达情况:与N组、S组比较,M组、EA组Bcl-2蛋白表达水平均下降（均P<0.05）。与M组比较,EA组Bcl-2蛋白表达水平显着升高（P<0.05）。（2）心肌组织Caspases-9m RNA、Caspases-3m RNA及Bax蛋白表达情况:与N组、S组比较,M组和EA组Caspase-9m RNA、Caspases-3m RNA及Bax蛋白表达显着升高（均P<0.05）,与M组比较,EA组的Caspase-9m RNA、Caspases-3m RNA及Bax蛋白表达水平均显着降低（均P<0.05）。实验5电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠FXR/SHP信号通路的影响（1）心肌细胞凋亡指数:与N组、S组比较,M组、EA组、EA+GW组、EA+Z组心肌细胞凋亡指数明显升高（P<0.05）;与M组比较,EA组、EA+GW组、EA+Z组心肌细胞凋亡指数均明显降低（均P<0.05）;与EA组比较,EA+Z组心肌细胞凋亡指数明显下降（P<0.05）,EA+GW组心肌细胞凋亡指数明显升高（P<0.05）。（2）心肌组织FXRm RNA、SHPm RNA表达情况:与N组、S组比较,M组、EA组及EA+GW组大鼠心肌细胞FXRm RNA、SHPm RNA表达水平均明显升高（均P<0.05）;与M组比较,EA组、EA+GW组、EA+Z组的FXRm RNA、SHPm RNA表达均有显着性降低（均P<0.05）;与EA组比较,EA+Z组FXR、SHPm RNA表达水平显着降低（P<0.05）,EA+GW组FXR、SHPm RNA表达水平明显升高（P<0.05）。（3）心肌组织Bcl-2、Bax、Caspases-3蛋白表达情况:与N组、S组比较,M组、EA组、EA+GM组及EA+Z组大鼠心肌细胞Bcl-2蛋白表达水平均下降（均P<0.05）,Bax、Caspase-3蛋白表达水平均显着升高（均P<0.05）。与M组比较,EA组、EA+GW组及EA+Z组的Bcl-2蛋白表达水平均明显升高（均P<0.05）,Bax、Caspase-3蛋白表达水平均明显降低（均P<0.05）,与EA组比较,EA+Z组Bcl-2蛋白表达水平显着升高（P<0.05）,EA+GW组Bax、Caspases-3蛋白表达水平均显着降低（均P<0.05）。（4）心肌组织Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值情况:与N组、S组比较,M组、EA组、EA+GW组及EA+Z组Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显升高（均P<0.05）,与M组相比,EA组、EA+GW组及EA+Z组Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显降低（均P<0.05）,与EA组比较,EA+Z组Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均显着降低（均P<0.05）,EA+GW组均显着升高（均P<0.05）。（5）心肌组织Gasdermin D、IL-1β、IL-18蛋白表达情况:与N组、S组比较,M组、EA组、EA+GW组及EA+Z组大鼠心肌细胞Gasdermin D、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均明显升高（均P<0.05）;与M组比较,EA组、EA+GW组及EA+Z组的Gasdermin D、IL-1β、IL-18蛋白表达均有显着性降低（均P<0.05）;与EA组比较,EA+Z组Gasdermin D、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均显着降低（均P<0.05）,EA+GW组均显着升高（均P<0.05）。结论 1.电针预处理能使MIRI模型大鼠心肌梗死面积及梗死程度明显下降,降低凋亡指数,病理形态学检测提示电针可显着改善受损心肌组织的病理损害程度。2.电针预处理能下调MIRI模型大鼠血清中LDH、CK及c Tn I的含量,保护大鼠心肌组织。3.电针预处理能抑制MIRI模型大鼠NLRP3、ASC、Caspase-1、Gasdermin D蛋白表达,通过抑制细胞焦亡,保护心肌组织。4.电针预处理能抑制MIRI模型大鼠Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值过度升高,通过抑制细胞过度自噬,保护心肌组织。5.电针预处理能下调MIRI模型大鼠Bax蛋白表达、Caspases-9m RNA、Caspases-3m RNA表达,上调Bcl-2蛋白表达,通过抑制细胞凋亡,保护心肌组织。6.电针预处理能通过抑制FXR/SHP凋亡信号通路从而抑制心肌细胞凋亡,抑制凋亡,能起到抑制细胞焦亡和抑制细胞过度自噬的作用,从该角度探讨三者间的联系,进一步说明电针预处理对MIRI的保护机制可能是多层次、多途径的综合效应。
张雯雯[2]（2021）在《益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮功能影响与机制的研究》文中进行了进一步梳理目的:缺血再灌注损伤可见于心、脑、肺、肾等人体多个重要器官,探究其病理机制,最大程度降低损伤,提高临床疗效越来越成为医学界的研究热点。缺血心肌再灌注（MIRI）后无复流、慢复流致使心律失常甚至再梗死等并发症严重影响血运重建治疗的临床预后,其机制涉及冠脉微循环病变。西医治疗方案尚缺乏安全有效防治冠脉微循环障碍的药物,特别是血运重建后期治疗方面,中医药能够发挥未病先防、既病防变的特色优势,临床疗效明显,较西药治疗费用更低。目前国内关于中药单体及复方防治MIRI的研究虽有一定进展,但缺乏对多靶点作用机制的深入探究。宫丽鸿教授以“风扰心络为病”理论为基础,提出益气搜风、养血解痉、通络止痛之治法,总结自身多年临床经验结合前人古方,形成益气搜风中药组方黄芪复方,寓意补养心络亏虚之气血、搜剔内扰之毒风,以助心脉气血调和、脉道息风通络,改善心肌细胞因缺血缺氧形成的组织结构与功能损伤。此法以补为通,寓通于补,通补兼施,相辅相成,补气而不留邪,剔邪而不伤正,针对本虚标实的病理特点,可谓标本兼治。本研究通过冠脉结扎法复制建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,以模型大鼠为研究对象,观察益气搜风中药黄芪复方对实验大鼠内皮功能影响与炎症反应、细胞凋亡相关因子蛋白与基因的表达,从对血管内皮功能的保护作用角度,探讨益气搜风中药对缺血再灌注损伤中微循环障碍的影响,并进一步揭示其产生作用可能相关的机制途径,丰富风扰心络为病之理论内涵,并为临床推广应用提供实验依据。材料与方法:1.心肌缺血再灌注损伤模型建立与益气搜风中药对模型大鼠内皮功能影响:将120只（240±20）g SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培哚普利组、益气搜风中药黄芪复方低中高剂量组,共6组,每组20只。根据成人（按体重60kg计算）常用剂量与实验动物用药剂量换算公式,折算出大鼠剂量,每组给予不同预处理。假手术组、模型组大鼠均予生理盐水10 mL·kg-1灌胃;益气搜风中药低、中、高剂量组分别予含黄芪复方1.8g·kg-1、3.6 g·kg-1、7.2 g·kg-1药液灌胃;培哚普利组予以含有培哚普利浓度为0.4mg·kg-1溶液灌胃。上述操作各组日1次,持续7d。第7d灌胃完毕1h采用冠脉结扎法建立心肌缺血再灌注模型;其中假手术组术中不结扎冠脉,余操作同其它各组;分别记录结扎30 min时与再灌注120 min时大鼠ECG情况;选取Ⅱ导联为实验中主要观察目标,以ST段变化作为心肌缺血标志;以ST段显着抬高判定结扎成功,以抬高的ST段回落幅度达1/2判定再灌注造模成功。造模成功后进行取材,取材前夜（即第6d）大鼠禁食不禁水。取腹主动脉取血,静置后离心,上清液-20℃保存,用于后续实验;采血后即刻处死大鼠,无菌条件下取出心脏,经灭菌生理盐水清洗以10%甲醛固定,-20℃冻存用于后续实验。采用ELISA法检测各组血清中TXA2、PGI2、s TM、s EPCR的含量,比较各组TXA2/PGI2比值。2.益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮炎症因子的影响:取已采集的各组大鼠血清,采用ELISA法检测各组血清中IL-8、IL-6、TNF-α含量。3.益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮细胞凋亡的影响:取已采集的各组大鼠心脏组织,电子天平称取左心室心尖部位100mg,高通量组织研磨仪研磨组织,研磨好的心肌组织置于预先配制好的500ul裂解液,以12000 rpm速度离心10 min后取上清液,经处理后采用Western Blot法测定各组Akt、P-Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达水平,采用蛋白质定量（BCA）法测定蛋白浓度,采用ECL化学发光检测法检测,实验结果通过成像系统显示;采用RT-PCR法测定Aktm RNA、eNOS m RNA、Baxm RNA、Bcl-2 m RNA表达水平,采用引物设计软件Primer Premier 5.0设计引物,采用2-ΔΔct法对各样品中基因的表达差异进行相对定量分析。统计学处理均采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析,Graphpad Prism 9.0.0版统计软件绘制数据分析图,计量资料以（?）表示,组间比较采用单因素方差分析,两两比较方差齐采用LSD检验。P<0.05表示存在统计学差异,P<0.01表示差异显着,P>0.05为差异不具有统计学意义。结果:1.心肌缺血再灌注损伤模型建立与益气搜风中药对模型大鼠内皮功能影响:1.1复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型:模型建立过程中各组大鼠存活情况:麻醉操作后,死亡1只大鼠;气管插管与术中行结扎、再灌注等操作时,因呼吸停止、大出血和室颤共造成37只大鼠死亡,其中假手术组5只、其他造模组32只。各组存活大鼠数量满足后续实验需求。造模情况:经心电图监测观察结扎时与再灌注后大鼠Ⅱ导联心电变化,筛除未符合ST段改变标准大鼠8只,成功造模总数59只,各组造模成功大鼠数量满足指标检测需求。1.2各组大鼠血清TXA2、PGI2水平及TXA2/PGI2比值:相较假手术组,模型组TXA2水平显着升高,PGI2水平显着降低,TXA2/PGI2明显升高（P<0.01）;相较模型组,培哚普利组和益气搜风中药黄芪复方各剂量组TXA2含量均显着降低,PGI2含量显着升高,TXA2/PGI2显着下降（P<0.01）;相较于培哚普利组,益气搜风中药中剂量组TXA2、PGI2含量与TXA2/PGI2均无明显差异（P>0.05）。1.3各组大鼠血清s TM、s EPCR水平:相较于假手术组,模型组s TM、s EPCR含量显着升高（P<0.01）;相较于模型组,培哚普利组和益气搜风中药各剂量组s TM、s EPCR含量均显着降低（P<0.01）;相较于培哚普利组,中药各剂量组s TM、s EPCR含量升高（P<0.05）。2.益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮炎症因子的影响:2.1各组大鼠血清IL-6、IL-8水平:相较假手术组,模型组IL-6、IL-8含量显着升高（P<0.01）;相较模型组,培哚普利组和中药各剂量组IL-6、IL-8含量均显着降低（P<0.01）;相较于培哚普利组,中药中剂量组IL-6、IL-8含量无明显差异（P>0.05）。2.2各组大鼠血清TNF-a水平:相较假手术组,模型组TNF-a含量显着升高（P<0.01）;相较于模型组,培哚普利组和中药各剂量组TNF-a含量均显着降低（P<0.01）;相较于培哚普利组,中剂量组TNF-a含量无明显差异（P>0.05）。3.益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮细胞凋亡的影响:3.1各组大鼠Akt、eNOS m RNA的表达:相较假手术组,模型组Akt m RNA、eNOS m RNA表达显着降低（P<0.01）;相较模型组,培哚普利组与益气搜风中药各剂量组Akt mRNA、eNOS m RNA表达均增加（P<0.05）;相较于培哚普利组,益气搜风中药中剂量组Akt mRNA、eNOS mRNA表达无明显差异（P>0.05）。3.2各组大鼠Akt、P-Akt蛋白表达与P-Akt/Akt 比值:相较假手术组,模型组Akt、P-Akt蛋白表达显着降低（P<0.01）;相较模型组,培哚普利组、益气搜风中药各剂量组Akt、P-Akt蛋白表达显着增加（P<0.01）;相较于培哚普利组,益气搜风中药中剂量组Akt蛋白表达、P-Akt/Akt 比值无明显差异（P>0.05）,高剂量组P-Akt蛋白表达无明显差异（P>0.05）。3.3各组大鼠Bcl-2、Bax mRNA的表达:相较假手术组,模型组Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达均升高（P<0.05）;相较模型组,培哚普利组与益气搜风中药各组Bcl-2mRNA表达均升高,Bax mRNA表达降低（P<0.05）;与培哚普利组相比,益气搜风中药中剂量组Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达无明显差异（P>0.05）。3.4各组大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达与Bcl-2/Bax比值:相较假手术组,模型组Bcl-2、Bax蛋白表达均显着升高,Bcl-2/Bax比值显着降低（P<0.01）;相较模型组,培哚普利组、益气搜风中药中剂量组Bcl-2蛋白表达与Bcl-2/Bax比值均显着升高,Bax蛋白表达显着降低（P<0.01）;相较于培哚普利组,益气搜风中药中剂量组Bcl-2蛋白表达无明显差异（P>0.05）。结论:1.益气搜风中药黄芪复方能够调控血管内皮功能损伤因子的表达,提示益气搜风中药复方对MIRI大鼠血管内皮功能可能具有保护作用。2.益气搜风中药复方能够下调大鼠IL-8、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达,提示益气搜风中药复方对MIRI大鼠心肌的保护作用可能与抑制炎性反应有关。3.益气搜风中药复方能够上调PI3K/Akt信号通路中关键靶蛋白Akt及其下游eNOS mRNA表达水平;干预Akt及P-Akt蛋白表达水平,调控P-Akt/Akt平衡;同时调控凋亡因子Bcl-2、Bax基因与蛋白的表达。提示益气搜风中药复方改善MIRI血管内皮功能的机制可能与激活PI3K/Akt信号通路活性从而调控细胞凋亡有关。
陈晨[3]（2021）在《曲美他嗪及缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制》文中研究指明目的:研究并初步讨论曲美他嗪预处理及缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的可能存在的潜在保护机制。方法:将清洁级60只成年雄性SD大鼠随机分为五组（n=12）:假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血后处理组（IP组）、曲美他嗪预处理组（TMZ组）、缺血后处理组+曲美他嗪预处理组（IP+TMZ组）（n=12）,Sham组的缝线并不对冠状动脉左前降支（left anterior descending coronary artery,LAD）进行结扎,其余四组对LAD进行结扎,在本实验模型中对大鼠进行缺血30min,再灌注120min处理,实验中观察各组室性心律失常情况并进行记录、统计。大鼠再灌注结束后,从腹主动脉用针筒抽取约2ml动脉血,并放入PE管中,在室温下静置,时间大约为0.5-1小时,最后进行离心并选取其上清液,放置-80℃超低温冰箱内保存。并测定血清中SOD、MDA、Tn TI、IL-6、TNF-α、CKMB含量。取血后迅速对大鼠进行处死,取出SD大鼠心脏,用预先准备好的冰盐水冲洗心脏,每组大鼠中选取4只用10%多聚甲醛固定后组织石蜡包埋。为确定每组心肌细胞凋亡数目,本实验采用TUNEL法来计算相关凋亡指数。并应用HE染色观察各组心肌组织的微结构变化。另外4只用来检测心肌梗死面积大小改变,本实验采用EB+TTC双染色法。剩下4只在缺血再灌注结束后,将心脏后冻存于-80℃超低温冰箱内,用于western blot检测caspase3、caspase9、bax、bcl-2、c-myc的表达。结果:⑴与Sham组相比:其余四组的心律失常评分升高,心肌梗死面积增多,SOD含量减少,CKMB浓度增多,MDA含量增多,IL-6、TNF-α含量增多,细胞凋亡指数增加,caspase3、caspase9、bax升高,bcl-2、c-myc降低。⑵与IR组相比:IP组、TMZ组、IP+TMZ组心律失常评分降低,心肌梗死面积减少,SOD含量增多,CKMB浓度减少,MDA含量减少,IL-6、TNF-α含量减少,细胞凋亡指数减少,caspase3、caspase9、bax减少,bcl-2、c-myc增多。⑶与IP+TMZ组相比:IP组、TMZ组心律失常评分升高,心肌梗死面积增多,SOD含量减少,CKMB浓度增多,MDA含量增多,IL-6、TNF-α含量增多,细胞凋亡指数增加,caspase3、caspase9、bax升高,bcl-2、c-myc降低。上述组间差异均具有统计学意义（P>0.05）。结论:在本实验中,我们可以看到缺血后处理、曲美他嗪预处理均可以减轻心肌缺血再灌注损伤,然而在IP+TMZ组中,无论从心律失常评分、心肌梗死面积、炎症因子、SOD、MDA、凋亡蛋白等指标均可以看到优于其他组,故我们得出曲美他嗪预处理加缺血后处理具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,且抗心肌再灌注损伤优于曲美他嗪预处理或缺血后处理单因素干预,这在临床上具有重大意义。
周桐[4]（2020）在《双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究》文中研究表明目的:本实验通过观察测定双参通脉颗粒干预心肌缺血再灌注造模后的大鼠血清中血管细胞粘附分子VCAM-1及白细胞介素IL-1β的含量变化,然后在光学显微镜下观察大鼠心肌细胞的形态学改变。探讨双参通脉颗粒对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞的作用及可能的作用机制,验证双参通脉颗粒治疗此类心血管疾病的有效作用,并为临床推广此类中医药疗法治疗疾病提供理论依据。材料与方法:制备院内中药制剂双参通脉颗粒。将大鼠随机分为六组:对照组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组十只大鼠。其中西药组予合心爽,中药组予不同剂量的双参通脉颗粒,每日1次进行药物灌胃,其余两组予等量的生理盐水灌胃,连续两周。之后通过结扎左冠状动脉前降支对大鼠进行造模手术,其中对照组只做开胸手术不做结扎手术,从而复制大鼠心肌缺血再灌注损伤的模型。从大鼠腹主动脉采集血清,分别按照VCAM-1及IL-1β的试剂盒要求,采用ELISA法测定各组指标含量,并用HE染色法制作心肌组织切片,在光学显微镜下观察形态学变化。结果:1.VCAM-1:与对照组比较,模型组及各个用药组VCAM-1水平明显提高（P<0.05）;与模型组比较,各个用药组VCAM-1水平明显下降（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量和高剂量组VCAM-1水平下降（P<0.05）;2.IL-1β:与对照组比较,模型组及各个用药组IL-1β水平明显提高（P<0.05）;与模型组比较,各个用药组IL-1β水平明显降低（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量和高剂量组IL-1β水平下降（P<0.05）;3.光学显微镜观察到,模型组大鼠细胞核肿胀变圆,心肌间质水肿,组织间隙增宽。中药组大鼠胞核未见明显肿胀,间质水肿减轻,心肌细胞排列较为致密整齐。结论:1.心肌缺血再灌注损伤后的大鼠血清中VCAM-1及IL-1β含量明显升高;2.双参通脉颗粒能够降低大鼠血清中VCAM-1及IL-1β的水平,且在一定范围内与药物剂量成正相关;3.双参通脉颗粒能保护心肌组织及细胞的结构,可能的机制是由于降低了大鼠VCAM-1及IL-1β水平。
姜丹[5]（2019）在《搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究》文中提出目的:本实验研究通过建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,从内皮功能、炎症反应、细胞凋亡角度探讨搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探析其作用机制,为搜风祛痰中药的临床应用提供理论依据。材料与方法:将140只SD大鼠适应性喂养7d,随机将大鼠分成假手术组、模型组、培哚普利组、搜风祛痰中药组四组,35只/组。根据成人每日用药临床推荐的常用剂量,按成人与大鼠体重折算系数6.3,折算成大鼠用量后给药,进行预处理,每日1次,继续灌胃7d。其中假手术组、模型组大鼠予以生理盐水10 mL·kg-1灌胃;搜风祛痰中药组大鼠予以搜风祛痰中药8.1g·kg-1灌胃;培哚普利组予以培哚普利片0.4mg·kg-1灌胃。在第7d灌胃结束后1小时建立心肌缺血再灌注模型,假手术组与其它三组手术过程相同,但不结扎。造模成功后每组随机选取10只大鼠进行取材,取材前夜禁食,经大鼠腹主动脉取血4 mL,静置30 min后离心,取上清液-20℃保存备用;取血结束后即刻处死大鼠,无菌条件下取出心脏,经预冷的灭菌生理盐水清洗后,心脏经10%甲醛固定,置于液氮中,-20℃冻存备用。采用ELISA法检测血清中VEGF、TXA2、PGI2、sTM、sEPCR、IL-8、IL-6、TNF-α含量;采用Western Blot法测定P-Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达水平;采用RT-PCR法测定Akt mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平。结果:1.ELISA法检测:1.1各组大鼠血清VEGF含量比较:模型组与假手术组相比,VEGF水平明显下降（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,VEGF水平升高明显（P<0.05）。1.2各组大鼠血清TXA2、PGI2含量及TXA2/PGI2比值比较:模型组与假手术组相比,TXA2水平明显升高,PGI2水平明显下降,TXA2/PGI2明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,TXA2水平下降明显（P<0.05）,PGI2水平升高不明显（P>0.05）,TXA2/PGI2下降明显（P<0.05）。1.3各组大鼠血清sTM、sEPCR含量:模型组与假手术组比较,sTM、sEPCR含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量升高（P>0.05）。1.4各组大鼠IL-6、IL-8含量比较:与假手术组比较,模型组IL-6、IL-8含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组IL-6、IL-8含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组IL-8含量降低（P<0.05）,IL-6含量升高（P>0.05）。1.5各组大鼠TNF-a含量比较:与假手术组比较,模型组TNF-a含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组TNF-a含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组TNF-a含量升高（P>0.05）。2.PCR检测2.1各组大鼠Akt mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Akt mRNA表达明显降低,（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Akt mRNA表达水平升高不明显（P>0.05）。2.2各组大鼠Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Bax mRNA表达明显升高,Bcl-2 mRNA表达明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Bax mRNA下降不明显,Bcl-2 mRNA增加不明显（P>0.05）。3.Western Blot蛋白印记检测（蛋白灰度统计）3.1各组大鼠P-Akt蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,P-Akt蛋白表达均降低（P<0.05）;培哚普利组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组比较,P-Akt蛋白表达降低不明显（P>0.05）。3.2各组大鼠Bax、Bcl-2蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,Bax、Bcl-2蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达降低、Bcl-2/Bax升高（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组Bcl-2和Bax蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）。结论:1.搜风祛痰中药能够使血清中VEGF含量上升,PGI2含量上升,TXA2的含量下降,保持TXA2/PGI2比例的平衡,降低血清中sTM、sEPCR水平,从而对大鼠心肌缺血再灌注后血管内皮功能具有保护作用。2.搜风祛痰中药能够降低血清中IL-8、IL-6、TNF-α的含量,说明搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与抑制炎症反应有关。3.搜风祛痰中药能够上调P-Akt蛋白表达水平;下调Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平;搜风祛痰中药能够上调细胞凋亡相关基因Akt mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平,下调细胞凋亡相关基因Bax mRNA表达水平;搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与激活Akt/Bax通路,抑制细胞凋亡有关。
康渊强[6]（2019）在《丹参酮ⅡA对缺氧所致内皮细胞的保护作用机制研究》文中提出目的:1通过研究丹参酮IIA（tanshinone IIA,TSA）对氧糖剥夺的人主动脉内皮细胞的作用机制,探究丹参酮IIA是否可以增加内皮细胞中的e NOS表达,诱导NO合成增加,保护受损血管内皮细胞的功能。2探究丹参酮IIA是否可以通过调控血管内皮细胞中mi R-24的基因表达,激活蛋白e NOS的表达,进而改善受损血管内皮细胞的功能。材料与方法:1自生物公司购买原代人主动脉内皮细胞（Human aortic endothelial cells,HAECs）后,在含有10%胎牛血清（Fetal bovine serum,FBS）的二甲基甲酰胺（Dimethylformamide,DMEM）培养基中生长至融合率7080%时,进行传代。2取对数生长期的含10%FBS的高糖DMEM培养下的HAECs建立缺糖无氧模型。3将HAECs缺糖无氧培养24h后分别加入不同浓度的TSA（0、10、30、50μg/ml）的DMEM培养基建立TSA干预组。4实验将HAECs分别分为空白对照组、缺糖无氧组、TSA给药组。5通过各组不同方式各培养48h后电镜下观察细胞形态。6应用MTT法检测内皮细胞存活率。7收集细胞上清液,利用ELISA法,根据检测试剂盒说明检测细胞上清液中蛋白e NOS的含量,应用Western blot法、q RT-PCR法检测e NOS表达。8采用q RT-PCR检测细胞中mi R-24基因表达含量。结果:1 TSA各给药组的细胞形态相比缺糖无氧组明显改善。2 TSA各给药组的HAECs存活率相比缺糖无氧组明显升高。3 TSA各给药组的HAECs内蛋白e NOS的表达显着升高。4 TSA各给药组的HAECs内mi R-24基因表达显着下调。结论:1 TSA能够改善血管内皮细胞形态2 TSA能够改善血管中受损内皮细胞的存活率3 TSA能够升高受损血管内皮细胞中蛋白e NOS的表达含量4 TSA能够下调血管内皮细胞中mi R-24基因表达的含量
秦伟彬[7]（2019）在《瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究》文中研究指明目的:本研究旨在通过评估中药复方瓜蒌薤白半夏汤加味结合前列地尔对冠心病患者冠脉介入术后心肌微循环状态的影响,为心血管疾病介入术后的中医药治疗提供理论依据。方法:本研究为随机对照的前瞻性临床试验,根据随机数字表方法抽取广西中医药大学第一附属医院心内科明确诊断为冠心病（急性ST段抬高型心肌梗死）且行经皮冠状动脉介入术治疗的患者为研究对象,根据治疗方案将患者分为瓜蒌薤白半夏汤结合前列地尔组（GQZ组）、瓜蒌薤白半夏汤组（GLZ组）、前列地尔组（QLZ组）。三组患者入院明确诊断后均给予抗凝、抗血小板、调脂、营养心肌、抑制心肌重塑等常规治疗,GQZ组患者在常规治疗的基础上,予前列地尔注射液20ug+生理盐水100ml静脉内缓慢静注,2次/日,术前30min开始应用至术后第7天,并于术前30min开始予瓜蒌薤白半夏汤加味（瓜蒌实20g、薤白10g、半夏10g、茯苓10g、丹参15g、党参15g、川芎15g、赤芍10g、桃仁10g、炙甘草10g,剂型均为免煎颗粒）,每日一剂,水冲100ml,术后坚持服用3个月;QLZ组患者在常规治疗基础上予前列地尔注射液20ug+生理盐水100ml静脉内缓慢静注,2次/日,术前30min开始应用至术后第7天;GLZ组患者术前30min开始予瓜蒌薤白半夏汤加味,每日一剂,水冲100ml,术后坚持服用3个月。分别记录三组研究对象的一般资料,疗效观察指标有心脏功能、术后3个月健康调查简表（SF-36）评估、中医证候评定、心电图ST段回落评估、TIMI血流分级及校正后TIMI帧计数、心肌灌注评价、肌钙蛋白及肌酸激酶同工酶峰值等心肌微循环状态评估指标。最后汇总资料分析。结果:本次研究中共计纳入研究对象90例,其中终止试验1例,试验脱落2例,最终纳入完成试验者共计87例,分别为GQZ组29例、QLZ组28例、GLZ组30例。结果显示三组患者一般资料无差异,术后三个月复查超声心动图提示三组患者左室射血分数差异有统计学意义（57.93±3.68VS 55.03±4.48 VS 56.29±5.07）%,P<0.05,而GLZ组与QLZ组两组组间相比较差异没有统计学意义（F=0.48,P=0.91）;术后3个月SF36量表评估结果显示三组研究对象在躯体疼痛、生理功能、一般健康状况、情感职能、活力、社会功能以及精神健康七个方面评分差异均有统计学意义（P<0.05）;中医证候评分结果显示除了QLZ组在心悸方面（P=0.06）,其它各组在胸闷方面、胸痛、心悸、身体困重感、舌苔方面治疗前后组内比较均存在显着差异（P<0.05）;心电图ST段回落方面,GQZ组术后ST段回落明显较好,ST段回落>70%的患者较其它两组多（P=0.048）,QLZ组、GLZ组患者两两比较差异没有统计学意义（P=0.16）;心肌灌注评价,GQZ组术后的MBG分级达到MBG 3级的患者所占比例比QLZ组、GLZ组较多,差异有统计学意义（P=0.17）,QLZ组、GLZ组患者两两比较差异没有统计学意义（P=0.12）;心脏标志物方面,三组患者cTnI、CK-MB达到峰值的时间差异有统计学意义,而QLZ组、GLZ组患者两两比较在cTnI、CK-MB达到峰值时间方面差异均没有统计学意义（P=0.85 VS P=0.21）,且从各组患者cTnI水平变化趋势来看,GQZ组患者在到达峰值后下降趋势明显快于其它两组;TIMI血流分级评估,GQZ组术后的TIMI3级获得率比其它两组高（P=0.048）,而QLZ组、GLZ组患者两两比较差异无统计学意义;术后CTFC评估,GQZ组效果优于其它两组,且GLZ组疗效同样优于QLZ组;试验过程中均无明显不良反应出现。结论:瓜蒌薤白半夏汤加味结合前列地尔对于改善痰瘀型冠心病患者PCI术后心肌微循环状态有显着疗效。
吴迪[8]（2019）在《双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠炎症因子IL-1及TNF-α的实验研究》文中认为目的:本实验通过观察各组大鼠心肌细胞病理学结构、检测炎性因子IL-1、TNF-α含量,来观察双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血后再灌注损伤心肌的影响与作用机制,为进一步的临床应用提供思路。材料与方法:1.实验动物分组及给药:SD大鼠随机分为5组:生理盐水空白对照组、模型组、阳性对照组（西药组）、高剂量双参通脉颗粒剂组（高剂量中药组）、低剂量双参通脉颗粒组（低剂量中药组）。模型组与空白对照组予生理盐水3ml/d灌胃,西药组予合贝爽4.23mg/（kg.d）,与生理盐水配成3ml溶液灌胃,高、低剂量中药组分别予双参通脉颗粒13,45mg/（kg.d）、37.5mg/（kg.d）,分别与生理盐水配制成3ml的盐溶液进行灌胃,连续灌胃4周后开始造模。2.实验动物造模:对模型组、高、低剂量中药组、西药组实验动物进行左冠状动脉前降下2mm处结扎30min后打开结扎线,建立心肌缺血再灌注模型,空白对照组只开胸穿线不结扎,造模成功后关闭胸腔。3.标本的采集及指标检测:处死后取结扎部位心肌组织,用于进行HE染色观察其病理形态学改变,并采集大鼠腹主动脉处血,严格按照相关检测试剂盒说明进行操作测定炎症因子白介素IL-1及TNF-α含量,观察双参通脉颗粒方对心肌缺血再灌注损伤的防治效果及作用机制,并进行统计学分析。结果:1.HE染色病理形态学观察:对照组心肌组织无明显变性、心肌纤维排列较规则、组织间隙水肿较轻;模型组有部分心肌局灶性坏死,心肌纤维断裂;高剂量中药组及低剂量中药组及西药组示心肌纤维较模型组排列规整、断裂较少,组织间隙水肿较轻,心肌间质轻度出血。2.血清IL-1、TNF-α含量:空白对照组IL-1、TNF-α少量表达;模型组IL-1、TNF-α大量表达;与模型组相比,西药组与中药组IL-1、TNF-α表达情况均有不同程度降低,其中以高剂量中药组中表达程度最低。说明双参通脉颗粒可减少IL-1、TNF-α的释放。结论:1.双参通脉颗粒可改善缺血再灌注后的心肌组织的结构。2.双参通脉颗粒可通过抑制炎性因子IL-1及TNF-α的表达来实现保护再灌注后心肌的作用。
罗万俊[9]（2014）在《远隔肢体缺血时处理对心脏瓣膜置换术器官保护的研究》文中认为第一章远隔缺血时处理对心脏瓣膜置换术多器官保护的研究研究目的体外循环心内直视手术后多器官的损伤一直是影响心脏外科患者术后疗效和远期生存预后的重要因素。如何减轻器官损伤一直是心脏外科的重要课题。心脏瓣膜疾病是后天性心脏病发病率较高的一类疾病,其中风湿性心脏病在我国是导致心脏瓣膜病变的主要病因,绝大多数风湿性心脏病患者术前均有不同程度的心肺肝肾等器官功能受损,体外循环手术创伤则进一步加重患者术后各器官功能损害。我们先前的研究表明远隔肢体缺血时处理可减少心脏瓣膜置换手术心肌cTnI的释放。本研究在前期研究的基础上,进一步通过较大样本量的研究,评价远隔缺血时处理能否减轻心脏瓣膜置换术后患者心肺肾肝重要器官的损伤,发挥器官保护作用。研究方法201例心脏瓣膜病在我院择期行心脏瓣膜置换术患者随机分为两组：对照组（CON.）100例,术中止血带包缚于右下肢近心端,不充气。远隔缺血时处理组（RIPerC.）101例,在阻断主动脉后立刻给予下肢止血带充气加压至600mmHg维持5min,再完全放气持续5min此为一个周期,重复三个周期。所有患者均由相同手术组医师实施手术,麻醉医生,术者,体外循环灌注师、术后医护人员及检验人员未告知研究的分组情况。术后给予常规治疗和监护。分别记录患者性别、年龄、体重、术前NYHA分级、术前房颤情况、术前EF值、手术方式、主动脉阻断时间、CPB时间、手术时间、术中心脏复跳情况、术后机械通气时间、术后正性肌力药物使用情况、术后24小时引流量、24小时尿量、ICU时间以及术后住院时间等临床指标进行统计分析。于术前、开放主动脉后12h、24h和48h抽取患者静脉血分别测定：①血清cTnI和CK-MB浓度；②BUN,肌酐,肌酐清除率,血清胱抑素C（CysC）,β微球蛋白等肾功能指标,③总胆红素（TBIL）谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）,血清白蛋白等肝功能指标;④血清C反应蛋白（CRP）浓度。术后连续血气分析,并记录术后0小时、1小时、3小时、6小时、12小时的氧合指数以及乳酸值。根据急性肾损伤诊断标准评价患者是否存在急性肾损伤。根据急性肺损伤诊断标准评价患者是否存在急性肺损伤。数据分析采用SPSS17.0统计软件。组间比较：使用X2检验分析计数资料；采用方差分析重复测量计量资料；采用单向方差分析非重复测量的计量资料。p<0.05认为差异具有显着性。研究结果两组患者在年龄、性别、体重、术前心功能分级、EF值、手术方式,手术时间,体外循环时间,主动脉阻断时间没有显着性差异,具有可比性。两组患者术后机械通气时间、ICU时间及住院时间无统计学差异。远隔缺血时处理组术后引流明显少于对照组（458.26±264.27ml VS545.10±349.00ml, P=0.048）;远隔缺血时处理组正性肌力药物评分低于对照组（96.45±473.79VS121.564±89.61,P=0.032）。远隔缺血时处理组术后48小时内血浆cTnI的浓度曲线下面积（AUC）值较对照组明显下降,有显着性差异（128.68±102.56vs172.33±±184.38；P=0.04）。术后48小时,远隔缺血时处理组患者的总胆红素明显低于对照组,有显着性差异（18.64±9.77μmol/L vs22.23±12.97μmol/L;P=0.028）。两组患者术后各时间点的乳酸值无明显差异,术后6小时远隔缺血时处理组患者的动脉血氧合指数明显高于对照组,有显着性差异（196.7±53.8mmHg vs178.6±55.5mmHg,P=0.02）。远隔缺血时处理组患者术后急性肺损伤的发生率较对照组的明显降低（36.6%VS51%,P=0.040）具有显着性差异。术后48小时,缺血时处理组患者血浆CysC值明显低于对照组,有显着性差异（0.91±0.31mg/L vs1.02±0.48mg/L, P=0.049）,远隔缺血时处理组术后48h血清肌酐值显着低于对照组（86.28±±18.49μmol/L vs111.38±39.29μmol/L,P=0.000）,但急性肾损伤发生率两组无显着差别。两组患者术后各时间点的CRP浓度组问无明显差别。研究结论远隔缺血时处理可以减少心脏瓣膜置换术后患者正性肌力药物用量,减少术后cTnI的释放,提示远隔缺血时处理能够减轻体外循环术后心肌缺血再灌注损伤,有一定心肌保护效果。同时远隔缺血时处理亦能对心脏以外的其他重要器官（肺脏、肝脏、肾脏）产生一定程度的保护作用。创新点：1首次在国内外进行远隔缺血时处理较大样本量的临床研究,进一步证实了我们先前的小样本量的研究结果,远隔缺血时处理可以减轻成人瓣膜置换术后心肌缺血再灌注损伤。2本实验首次对远隔缺血时处理心脏以外的器官保护进行了临床研究。证明远隔缺血时处理对肺脏、肝脏和肾脏损伤有一定程度的保护作用。第2章远隔缺血时处理对心脏瓣膜置换术心肌微小RNA表达和心肌细胞凋亡的作用研究目的本实验旨在观察远隔缺血时处理对风湿性心脏瓣膜病患者瓣膜置换术心肌微小RNA （miRNAs）表达的影响和对心肌细胞凋亡的作用,从微小RNA的角度探讨远隔缺血时处理对心肌缺血-再灌损伤保护的可能机制。研究方法30例风湿性心脏瓣膜病择期行双瓣膜置换术患者,随机分为两组：对照组（CON.）15例；远隔缺血时处理组（remote ischemic perconditioning, RIPerC.）15例。止血带包缚于右下肢近心端,对照组不充气,处理组在阻断主动脉后立即将止血带加压充气,其压力为600mmHg并且持续5min,然后完全放气完全松弛5min,改为一个周期,共行三个周期。将患者的一般资料、术前的心功能、术后机械通气的时间、术后引流量、术后重症监护的时间、术后使用正性肌力药物的用量、术后严重的并发症和总的住院时间作为观察指标。术后随访病人30天。分别于主动脉阻断前、开放主动脉阻断钳后5分钟,剪取少许右心耳组织,采用miRNA微阵列芯片法检测其差异表达；RT-PCR法进一步验证4种心肌miRNAs表达,RT-PCR法检测BCL2, BAX和PDCD4的mRNA表达,Westen Blot法检测BCL2, BAX和PDCD4凋亡蛋白表达。TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。统计学处理：使用SPSS17.0软件统计分析数据。组间比较：非正态分布的数据采用Mann-Whitney秩和检验；计数资料采用X2检验；不同时间点的miRNAs, mRNA以及蛋白表达情况采用t检验。认为p<0.05有显着性差异,具有统计学意义。研究结果两组病例术前的一般资料、手术的方式、手术的时间、主动脉阻断的时间以及体外循环的时间没有统计学意义,有可比性。所有病例均顺利康复,无并发症及死亡。心肌组织miRNAs微阵列检测显示,体外循环术后有17个miRNA表达变化,其中13个miRNA显着上调（miR-1, miR-17, miR-19b, miR-20a, miR-33a, miR-130a, miR-140-5p, miR-195, miR-301a, miR-324-5p, miR-377, miR-491-5p and miR-657）,4个miRNA下调（miR-21, miR-24, miR-1275andmiR-1973）,缺血时处理组心肌缺血再灌注后miRNAs表达与对照组miRNAs表达谱比较显示,缺血时处理组miR-1, miR-17, miR-20a,, miR-130a, miR-140-5p, miR-195表达下调,而miR-21,miR-24, miR-1275表达上调。而miR-19b, miR-33a, miR-301a, miR-324-5p, miR-377, miR-491-5p, miR-657and miR-1973的表达两组则无显着差别。RT-PCR对miR-1, miR-21, miR-24和miR-195进行定量检测结果显示,与对照组比较,RIPerC组的miR-1和miR-195的表达均显着下调（P<0.05）该结果与miRNAs微阵列检测结果一致,但是RIPerC组的miR-24和miR-21的表达情况与对照组无统计学意义上的差别。RT-PCR对心肌Bcl-2、BAX和PDCD4的mRNA表达,实验组心肌BCL2mRNA表达较对照组显着上调（2.4倍,P<0.05）, BAX, PDCD4mRNA表达无明显变化。Western Blot检测心肌Bcl-2、BAX和PDCD4蛋白表达。实验组的BCL2（1.3倍,P<0.05）蛋白表达与对照组比较显着增加,而BAX蛋白表达明显减少（0.5倍,P<0.05）。TUNEL法检测两组患者心肌细胞凋亡情况,结果显示实验组心肌凋亡细胞数较对照组明显减少。研究结论下肢远隔缺血时处理可以调控体外循环心脏瓣膜置换术患者心肌MicroRNAs的表达,使miRNA-1和miRNAs-195表达下调。下肢远隔缺血时处理减轻心肌细胞凋亡,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达和减少促凋亡蛋白BAX表达。远隔缺血时处理可能通过对心肌相关]miRNAs的调控,抑制心肌细胞凋亡。确切结论有待进一步研究。创新点1.本研究首次研究了远隔缺血时处理心脏瓣膜置换停跳体外循环手术的心肌miRNAs表达的影响。2.本研究首次探讨了远隔缺血时处理对心脏停跳体外循环手术的人心肌凋亡基因和蛋白表达的影响。不足与展望1.本部分研究病例数尚有限,组间条件亦难以完全均衡,可能影响结果评价。2.不同的缺血处理模式可能对研究结果有不同的影响,由于客观条件限制,未能进行多种缺血处理的对比研究。3.本研究未对缺血时处理后心肌miRNAs表达变化与凋亡基因之间关系进行深入研究,因此未能明确两者之间的相关性。但我们的研究结果也为后续研究提供了新的研究方向和思路。
张树龙[10]（2012）在《自主神经与心律失常》文中研究表明自主神经系统（ANS）对心律失常的发生、维持以及症状的产生都具有重要作用,因而越来越受到临床医生的重视。自主神经系统与心律失常密切相关的主要依据有:实验与临床研究表明,虽然许多心律失常的折返机制有其解剖基础,但大多数的快速心律失常（以及一些缓慢性心律失常）发作通常是阵发性的,表明在心律失常的发生中有一个或者多个因素起着关键性或者辅助性作用,而自主神经系
二、心肌缺血时血小板功能变化的机制(英文)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、心肌缺血时血小板功能变化的机制(英文)（论文提纲范文）
（1）电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及FXR/SHP通路的调控作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验一 电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌损伤标志物、凋亡指数和形态学的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞焦亡的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞自噬的影响 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌细胞凋亡的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 电针预处理对心肌缺血再灌注模型大鼠FXR/SHP通路的调控作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录一 文献综述 心肌缺血再灌注损伤相关信号通路研究进展 |
| 参考文献 |
| 附图二 |
| 附录三 读博期间发表论文、科研情况 |
| 致谢 |
（2）益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮功能影响与机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 心肌缺血再灌注损伤模型建立与益气搜风中药对模型大鼠内皮功能影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠血管内皮细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 现代医学对心肌缺血再灌注损伤认识与研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医学对心肌缺血再灌注损伤的认识与研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（3）曲美他嗪及缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及实验室条件 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验器械 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验分组与处理 |
| 2.2 大鼠缺血再灌注模型建立 |
| 2.2.1 操作缺血再灌注模型时的注意事项 |
| 2.2.2 实验动物排除标准 |
| 2.3 心律失常的评价 |
| 2.4 心肌梗死面积计算 |
| 2.5 组织石蜡包埋切片 |
| 2.6 HE染色实验步骤 |
| 2.7 TUNEL染色实验步骤 |
| 2.8 Western blot检测 |
| 2.9 生化及ELISA检测 |
| 3.统计学方法 |
| 结果 |
| 1、曲美他嗪及后处理对缺血及缺血再灌注心律失常的影响 |
| 2、心肌细胞梗死面积 |
| 3、大鼠心肌酶学(CKMB)指标监测 |
| 4、大鼠炎症指标(TNF-a、IL-6)检测 |
| 5、大鼠MDA、SOD检测 |
| 6.大鼠心肌细胞形态学改变 |
| 7.大鼠TUNEL检测 |
| 8.大鼠凋亡蛋白检测 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 心肌缺血 /再灌注损伤的机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 心肌缺血再灌注损伤的中西医研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（5）搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注血管内皮细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（6）丹参酮ⅡA对缺氧所致内皮细胞的保护作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分:理论研究 |
| 1、中医病理产物在冠心病中研究进展 |
| 1.1 中医“痰邪”在冠心病的病理内涵 |
| 1.2 中医“瘀邪”在冠心病的病理内涵 |
| 1.3 痰瘀型胸痹的现代研究 |
| 2、中医对冠心病心肌微循环的研究 |
| 3、冠心病心肌微循环的治疗 |
| 3.1 中医治疗 |
| 3.2 西医治疗 |
| 4、基于循证医学对“化瘀祛痰”类中药改善胸痹PCI术后微循环的研究 |
| 4.1 资料与方法 |
| 4.2 文献检索结果 |
| 4.3 Meta分析结果 |
| 4.4 讨论 |
| 第二部分:临床实验 |
| 1、临床资料与研究方法 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究目的 |
| 1.3 诊断标准 |
| 1.4 病例纳入标准与排除标准 |
| 1.5 试验方法 |
| 1.6 观察项目 |
| 1.7 统计方法 |
| 2、结果与分析 |
| 3、讨论 |
| 3.1 立法思想 |
| 3.2 组方解析 |
| 3.3 前列地尔在改善微循环的研究 |
| 3.4 “瓜蒌-薤白”与前列地尔在心肌缺血预适应的相关性研究 |
| 3.5 心肌微循环的现代研究与中医“痰瘀”相关性 |
| 3.6 “化瘀祛痰”在改善心肌微循环的研究 |
| 3.7 心肌微循环的评估 |
| 4、不足与展望 |
| 第三部分 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附表1 痰瘀型胸痹中医证候疗效评价量表 |
| 附表2 中英文缩略词表 |
| 综述 冠心病心肌微循环障碍诊疗新进展概述 |
| 1、发生机制 |
| 2、主要评估方法 |
| 2.1 冠脉造影 |
| 2.2 血管内多普勒超声技术 |
| 2.3 微循环阻力指数 |
| 2.4 心脏磁共振显像 |
| 2.5 心脏核磁灌注成像 |
| 3、心肌微循环障碍的主要改善方法 |
| 3.1 经皮冠状动脉介入治疗 |
| 3.2 中医药治疗 |
| 3.3 其他 |
| 4、展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间主要的研究成果 |
（8）双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠炎症因子IL-1及TNF-α的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（9）远隔肢体缺血时处理对心脏瓣膜置换术器官保护的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要英文缩略语表（一) |
| 主要英文缩略语表（二) |
| 主要英文缩略语表（三） |
| 主要英文缩略语表（四) |
| 前言 |
| 第一章 远隔缺血时处理对心脏瓣膜置换术中多器官保护作用的临床研究 |
| 1.1 研究对象和方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 结论 |
| 第二章 远隔缺血时处理对心脏瓣膜置换术心肌微小RNA表达和凋亡的作用 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 第一部分：缺血处理的多器官功能保护的研究现状 |
| 参考文献 |
| 第二部分：microRNA研究现状 |
| 参考文献 |
| 在读期间论文,成果,课题及获奖情况 |
| 致谢 |
四、心肌缺血时血小板功能变化的机制(英文)（论文参考文献）
- [1]电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及FXR/SHP通路的调控作用[D]. 李晨. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]益气搜风中药对心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮功能影响与机制的研究[D]. 张雯雯. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [3]曲美他嗪及缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制[D]. 陈晨. 福建医科大学, 2021(02)
- [4]双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究[D]. 周桐. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [5]搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究[D]. 姜丹. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [6]丹参酮ⅡA对缺氧所致内皮细胞的保护作用机制研究[D]. 康渊强. 辽宁中医药大学, 2019(02)
- [7]瓜蒌薤白半夏汤加味联合前列地尔对冠心病PCI术后心肌微循环的研究[D]. 秦伟彬. 广西中医药大学, 2019(03)
- [8]双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠炎症因子IL-1及TNF-α的实验研究[D]. 吴迪. 辽宁中医药大学, 2019(02)
- [9]远隔肢体缺血时处理对心脏瓣膜置换术器官保护的研究[D]. 罗万俊. 中南大学, 2014(02)
- [10]自主神经与心律失常[J]. 张树龙. 江苏实用心电学杂志, 2012(06)