一、Ultrastructural changes in Bruch’s membrane of apolipoprotein E-deficient mice（论文文献综述）
邱丹丹[1]（2021）在《脉络膜新生血管树鼩模型的建立及其关键信号通路的揭示》文中提出[目 的]脉络膜的病理性新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）是导致失明的主要原因之一,是多种眼底疾病的共同病理特征。目前,CNV的形成机制尚未完全阐明。动物疾病模型是研究CNV发病机制的重要工具。由于非人灵长类动物具有来源少、成本高、饲养困难、造模时间长等缺点,而啮齿类动物和兔子的视网膜结构和眼底血液循环与人类差异大。现已建立的动物模型在CNV相关研究中的应用受到限制。因此,急需建立与人类CNV症状相似的动物模型。树鼩的色觉功能较好,辨色准确率较高,其中视网膜中的细胞主要以视锥细胞为主,感光变化敏感度高,与人类的黄斑区功能很相似。本研究旨在利用氪激光光凝诱导树鼩CNV的形成,通过高通量测序筛选CNV形成的重要调控分子和关键信号通路,为进一步的功能验证提供线索,为研究CNV的发病机制和药物治疗方向及靶点提供依据。[方 法]通过氪激光光凝损伤21只树鼩视网膜,诱导络膜新生血管形成,通过病理切片HE染色和CD31免疫组织化学染色检测光凝术后树鼩视网膜和脉络膜中新生血管的形成及病理变化情况。通过高通量转录组测序获得光凝术后7天、21天、30天脉络膜和视网膜的mRNA表达谱。在此基础上,通过层次聚类分析、加权基因共表达网络分析（Weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）、GO功能注释、KEGG功能富集和蛋白-蛋白相互作用网络分析（Protein-Protein interaction,PPI）筛选CNV不同病程中重要的调控基因和关键的信号通路,并通过RT-qPCR验证RNA测序结果。[结 果]病理切片HE染色结果显示光凝损伤7天后,视网膜水肿,脉络膜Haller’s层破坏,脉络膜中可见新生血管形成,于新生血管处可见巨噬细胞和成纤维细胞;光凝损伤14天后,视网膜中可见新生血管形成,导致神经节细胞层（Ganglion cell layer,GCL）被破坏,神经纤维层（Nerve fiber layer,NFL）结构紊乱,脉络膜中新生血管增多,结构破坏加剧;光凝损伤21天后,视网膜中新生血管官腔变大,脉络膜中新生血管附近仍可见成纤维细胞和巨噬细胞,脉络膜结构损伤维持稳定,光凝损伤后30天,视网膜水肿有消退的现象,新生血管处未见明显巨噬细胞及纤维细胞。CD31免疫组织化学染色实验结果显示,光凝术后第7天,巩膜及脉络膜下可见CD31染色阳性的CNV;第14天,视网膜和脉络膜中可见CD31染色阳性的CNV;第21天,视网膜和脉络膜中CD31染色阳性新生血管的管腔变大;第30天,CD31染色阳性的新生血管数量减少。通过光学显微镜对微血管进行计数发现光凝术后微血管密度（Micro vessel density,MVD）高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。光凝术后第14天和第21天MVD明显增多,高于光凝7天组,且第14天与第21天的MVD无显着差异,光凝术后第30天,MVD减少。对光凝术后7天、21天和30天树鼩视网膜和脉络膜组织中mRNA进行高通量测序,在脉络膜中共获得350个差异表达基因（Differential expression genes,DEGs）,其中黄色模块（“ME-yellow”）基因 59 个,蓝色模块（“ME-blue”）基因28个;视网膜中共获得69个,其中淡绿色模块（“ME-turquois”）基因20个。GO和KEGG分析表明,脉络膜中的DEGs主要参与细胞膜的运输;“ME-blue”中的DEGs主要参与IgA产生、抗原呈递和细胞粘附分子信号转导相关的通路;“ME-yellow”中的DEGs参与脂肪酸代谢和PPAR信号通路,而“ME-turquois”中的DEGs参与GABAergic突触、神经活性配体-受体相互作用、胆碱能突触和逆行内源性大麻素信号通路。PPI网络分析表明,核糖体蛋白家族基因（RPL31、RPL7、RPL26L1,RPL19）是“ME-blue”的关键因子,酰基辅酶A基因超家族（ACACA、ACAT1 ACAA2,ACACB）和FASN基因是“ME-yellow”的关键因子,溶质载体基因家族（SLC17A6、SLC32A1、SLC12A5、SLC6A1）和补体基因（C4A,C3,C2）是“ME-turquois”的关键因子。[结 论]1.本研究通过波长为647nm的氪激光,光凝斑直径为50μm,曝光时间为0.01～0.05s,激光能量为350mw,可诱导树鼩CNV的形成,其诱发时间短,病理特征和人类相似,是研究CNV发病机制和药物治疗方向及靶点的理想动物模型。2.通过高通量转录组测序获得CNV不同病程（7天、21天、30天）视网膜和脉络膜mRNA表达图谱,经生物信息学分析发现核糖体家族基因（RPL31、RPL7、RPL26L1,RPL19）、溶质载体家族基因（SLC17A6、SLC32A1、SLC12A5、SLC6A1）、酰基辅酶A超家族基因（ACACA、ACAT1 ACAA2,ACACB）和补体基因（C4A,C3,C2）为树鼩CNV形成过程中的重要调控分子,脂肪酸代谢通路和细胞黏附分子信号为本研究相关的显着富集通路,推测其在树鼩CNV发生发展过程中可能发挥重要作用,为进一步研究其功能提供了理论基础,为研究CNV形成机制和药物治疗方向及靶点提供了依据。
魏志远[2]（2020）在《饮食诱导的食蟹猴年龄相关性黄斑变性模型中肠道菌群的失调及其作用的研究》文中进行了进一步梳理目的:年龄相关性黄斑变性（Age-related macular degeneration,AMD）是一个多因素导致的性神经退行性疾病,是中老年人不可逆性失明的重要原因,其发病机制尚未完全明确,而早期防治更是其中的关键和难点。流行病学研究表明,饮食与代谢可能是与AMD的发生有关。近年来有报道称高热量饮食可能通过肠道菌群作用促进小鼠发生AMD样改变。但目前这些研究都局限于无黄斑结构的啮齿类动物,缺乏较稳定的非人灵长类AMD模型是制约该疾病研究的瓶颈,AMD相关分子机制仍然需要在灵长类模型中进一步探讨。方法:先通过高糖高脂（High sugar and high fat,HSHF）饮食诱导AMD食蟹猴（Macaca fascicularis）模型并进行多组学分析,再通过C57BL/6J小鼠和细胞实验分别进行体内和体外验证。（1）将10只雄性青年猴随机分成两组,HSHF组（N=5）和对照组（N=5）;将30只雄性中年食蟹猴中年食蟹猴也随机分为2组,HSHF组（N=25）和对照组（N=5）,进行36个月的饮食诱导。对食蟹猴粪便进行宏基因组测序,对其外周血白细胞进行转录组测序,并对眼底进行影像学分析。（2）将33只16月老龄鼠分为3组,对照组8只,HSHF组13只,HSHF+AMD猴粪菌移植组12只,处理20周后,评估各组视网膜AMD样改变。（3）将24只8周龄小鼠随机平均分成三组,对照组,激光诱导视网膜新生血管模型组（retinal neovascularization,RNV）,RNV+AMD猴粪菌移植组,七天后观察视网膜新生血管情况。利用16s r RNA基因高通量测序分析小鼠的肠道菌群。（4）用含有AMD猴血清的培养基培养人外周血单核细胞THP1与视网膜色素上皮细胞ARPE19,进行细胞增殖实验和油红O染色。结果:（1）长期HSHF饮食诱导后,青年猴与中老年猴均出现高胆固醇血症,但只有中老年猴出现了显着AMD病理性改变,且随着诱导时间增加而加重。（2）食蟹猴外周血转录组测序结果显示炎症和代谢相关通路上调,如甘油脂和碳水化合物代谢。（3）肠道菌群的宏基因组测序结果显示AMD猴肠道菌群多样性指数都呈现出下降的趋势。差异菌分析结果显示Faecalibacterium prausnitzi等益生菌在AMD组中显着下调,而Escherichia coli等潜在的有害菌丰度增加。在菌群功能方面,结果显示有害物质如肠杆菌素与腐胺以及脂多糖等的合成上调,而亚硝酸还原酶、丁酸激酶和酪丁酸合成等潜在有益功能下调。（4）AMD猴的粪菌移植加重了HSHF饮食小鼠的AMD样改变,如视网膜色素上皮层出现了脱色素与不规则改变;同时视网膜炎症反应和代谢增强,如对T细胞、巨噬细胞、粒细胞趋化性的正调控等;此外,视网膜对脂肪酸的转运与脂质的代谢也增强。16s r RNA基因高通量测序分析结果显示HSHF饮食会使小鼠小肠菌群物种多样性指数增加,而AMD粪菌移植会导致物种总数与多样性下调。（5）移植AMD猴粪菌使得小鼠视网膜下新生血管面积增加且小肠菌群发生了显着改变,部分益生菌丰度明显下降。（6）用AMD猴血清进行培养人外周血单核细胞与视网膜色素上皮细胞中的使脂质积累增加。结论:长期HSHF饮食可诱导食蟹猴AMD病理表现,其中年龄是AMD发生的重要因素,而长期的高胆固醇血症和肠道菌群失调可能是其潜在的重要促进因素。
杜益茗[3]（2020）在《香椿叶提取物对高脂饮食所致视网膜损伤机制研究》文中研究指明目的探讨香椿叶提取物对高脂饮食所致的小鼠视网膜损伤机制。方法雄性健康的C57BL/6J小鼠40只,随机分4组:正常组（NC组）、高脂饮食组（HF组）以及低剂量和高剂用药组（L-TSLE组和H-TSLE组）。对小鼠进行视网膜电图（ERG）,光学相干断层扫描（OCT）,荧光素眼底血管造影（FFA）,血脂四项检测,HE染色,免疫荧光,Western blot检测视网膜瘦素受体、JAK2、STAT3、VEGF、SOCS3蛋白表达水平。结果在第30周时,血脂四项检测结果表明,TSLE可以上调HDL-C同时下调TG、TC、LDL-C;HE结果显示,TSEL改善了高脂饮食引起的视网膜内核层及外核层细胞排列紊乱,视网膜色素上皮层结构破坏;FFA结果提示,TSLE明显减少了高脂饮食所引起的视网膜血管荧光素充盈的延长时间;ERG结果提示,TSLE能够显着性升高a波和b波振幅,提示它可以减轻高脂饮食引起的视网膜功能的损害,改善视网膜功能;此外Western blot显示,TSLE还可能下调脂代谢相关的瘦素受体和上调JAK2、STAT3、VEGF、SOCS3蛋白的表达。结论香椿叶提取物对脂代谢异常引起的视网膜损伤具有保护作用,并可能是通过JAK/STAT通路调节的。
蔡斌翠[4]（2019）在《蛋白组学分析吸烟对ARMS2/HTRA1高危型RPE细胞的影响及优化干细胞系建立》文中研究说明目的1、通过基于iTRAQ技术的蛋白质谱分析对吸烟者血清和非吸烟者血清作用于ARMS2/HTRA1高危型及野生型RPE细胞前后蛋白质谱的测定,筛选组间差异蛋白,并对其进行功能和通路富集分析,探究吸烟与ARMS2/HTRA1高危基因型在AMD发病中的作用机制,寻找二者之间关联及影响的直接证据。2、应用CRISPR/Cas9基因编辑技术对干细胞进行靶基因修饰,建立ARMS2高危型、HTRA1高危型纯合优化干细胞系,从而达到将紧密连锁的ARMS2/HTRA1高危基因分开研究的目的,为之后特异性的分析ARMS2以及HTRA1的分子生物学特性,明确AMD真正的致病基因提供了细胞模型。方法1、从预筛选的健康人群分别收集吸烟者血清和非吸烟者血清,探索最佳血清作用浓度。收集角膜移植后的供体眼球,分离培养ARMS2/HTRA1高危型及野生型个体来源的人原代RPE细胞。同时,将ARMS2/HTRA1高危型及野生型个体来源的iPSCs定向诱导分化为iPSCs-RPE细胞。将预混的吸烟者血清和非吸烟者血清分别作用于ARMS2/HTRA1高危型及野生型的原代RPE细胞7天后,提取各实验组的细胞总蛋白,进行基于iTRAQ技术的蛋白质谱检测,Q-Exactive质谱仪检测肽段信号,Thermofisher Proteome Discoverer1.3/1.4软件进行数据采集及分析,得到差异蛋白谱。筛选pvalue<0.05和ratio值1.2倍（上调1.2、下调0.833）的蛋白为可信的差异蛋白。对可信的差异蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。重复蛋白质谱样品准备的作用条件于高危型及野生型iPSCs-RPE细胞,通过Real-time PCR、Westernblot、IF等实验方法验证筛选出的差异蛋白。通过用FITC标记的感光细胞外节段（POS）与吸烟者血清和非吸烟者血清作用后的高危型iPSCs-RPE细胞共培养,检测各组细胞吞噬功能的差异。2、构建HTRA1过表达慢病毒感染ARPE-19细胞系,嘌呤霉素筛选获得HTRA1过表达稳转细胞株后,检测Caveolin-1的表达水平,探索HTRA1过表达与Caveolin-1表达的关系。3、应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,根据靶基因序列设计sgRNA,构建打靶载体,对ARMS2/HTRA1高危型干细胞进行靶向基因修饰,建立ARMS2高危型、HTRA1高危型纯合优化干细胞系。结果1、高通量质谱分析发现吸烟者血清作用下,不同于野生型的高危型的差异蛋白有400个,筛选剔除个体差异蛋白,得到Caveolin-1等7个具有明显差异的可信蛋白。通过Real-time PCR、Western blot和IF等实验验证了吸烟者血清暴露后,高危型RPE细胞中Caveolin-1在mRNA和蛋白水平均表达上调,且RPE细胞的吞噬功能增强。2、过表达HTRA1的稳转细胞株中,Caveolin-1在mRNA水平和蛋白水平表达显着增强。吸烟者血清与AMD高危基因HTRA1过表达对于Caveolin-1蛋白表达增强有协同叠加作用。3、成功建立ARMS2高危型、HTRA1高危型纯合优化干细胞系,为之后ARMS2/HTRA1高危基因在AMD致病机制中的分别研究提供细胞模型。结论蛋白组学分析吸烟者血清刺激后,ARMS2/HTRA1高危型RPE细胞的差异蛋白变化明显大于野生型,这些差异蛋白表达的变化很可能与AMD的发病相关。该研究证明了AMD的高危基因HTRA1表达上调和AMD高危环境因素吸烟,通过上调Caveolin-1的表达,代偿性增强RPE细胞吞噬功能,引起氧化负担加重,导致废物的积累、消除及随后的炎症反应最终导致感光细胞的破坏,从而促进AMD的发生和发展。
王彤淼,秦波[5]（2019）在《年龄相关性黄斑变性的动物模型研究进展》文中研究指明年龄相关性黄斑变性（ARMD）是当代世界65岁以上人群视力丧失的主要原因。对ARMD有效治疗方法的研究需求促进了多种动物模型的发展。ARMD是一种复杂的异质性疾病,涉及遗传、年龄和环境因素等多种危险因素的相互作用。动物模型重建了ARMD的许多组织学特征,使人们对该疾病潜在病理机制的深入了解成为可能。尽管没有一种模型能复制出人类ARMD的所有表型,但可通过表达ARMD的不同特征,揭示ARMD发展过程中慢性氧化损伤、炎症、免疫失调和脂质代谢的作用。本文将对已报道的多种ARMD动物模型进行综述,通过对各模型优势和局限性的分析,为选取合适的动物模型进行相应研究提供一定的帮助,并提供新的造模思路。
潘俊如,王琛,余其林,张述,李斌,胡军[6]（2014）在《Effect of Methyl-CpG Binding Domain Protein 2（MBD2） on AMD-like Lesions in ApoE-Deficient Mice》文中研究表明The role of methyl-CpG binding domain protein 2（MBD2） in an ApoE-deficient mouse model of age-related macular degeneration（AMD） was investigated. Eight-week-old Mbd2/ApoE double deficient（Mbd2-/- ApoE-/-） mice（n=12, 24 eyes, experimental group） and MBD2（wt） ApoE-/- mice（n=12, 24 eyes, control group） were fed on Western-type diet for 4 months. The mice were sacrificed, and total serum cholesterol levels were analyzed and Bruch’s membrane（BM） of the eyes was removed for ultrastructural observation by transmission electron microscopy. Moreover, intercellular adhesion molecule 1（ICAM-1） immunoreactivities were evaluated by fluorescence microscopy in sections of the eyes in both groups for further understanding the function mechanism of MBD2. There was no significant difference in the total serum cholesterol levels between control group and experimental group（P>0.05）. Transmission electron microscopy revealed that AMD-like lesions, various vacuoles accumulated on BM, notable outer collagenous layer deposits and dilated basal infoldings of retinal pigment epithelium（RPE） were seen in both groups, and the BM in control group was significantly thickened as compared with experimental group（P<0.05）. Fluorescence micrographs exhibited the expression of ICAM-1 in choroid was higher in control group than in experimental group. We are led to conclude that MBD2 gene knockout may lead to accumulation of more deposits on the BM and influence the pathogenesis of AMD via triggering endothelial activation and inflammatory response in choroid, improving microcirculation, and reducing lipid deposition so as to inhibit the development of AMD-like lesions. Our study helps to provide a new therapeutic approach for the clinical treatment of AMD.
刘俊[7]（2014）在《光诱导视网膜变性猪模型移植治疗中活体鉴定的初步研究》文中认为目的：用可见光诱导的方法建立广西巴马小型猪视网膜变性（Retinal Degeneration，RD）模型，探索活体对猪形态和功能学进行检测的方法并与离体组织学检测手段一起对该模型进行鉴定。然后，初步探索将人胚胎干细胞（human Embryonic Stem Cell，hESC）诱导分化的视网膜色素上皮细胞（Retinal Pigment Epithelium，RPE）移植到光诱导视网膜变性猪视网膜下腔的手术方法，通过活体检测方法观察细胞移植术后的安全性、移植细胞和猪视网膜的形态和功能学变化，为干细胞移植治疗视网膜变性疾病最终进入临床奠定基础。方法：1.光诱导广西巴马小型猪视网膜变性模型的建立与鉴定采用白色荧光灯持续间断光照猪3个月以上，诱导猪发生视网膜变性，运用活体形态检测方法-视网膜光学相干断层扫描（Optical Coherence Tomography，OCT）以及活体功能学检测技术-全视野视网膜电图（full-field Eletroretinography，fERG）和多焦视网膜电图（multifocal Electroretinography，mfERG），对猪视网膜进行鉴定，并与视网膜组织切片HE染色和视网膜透射电镜进行比较分析。2.初步探索光变性猪行hESC来源的RPE细胞视网膜下腔移植的手术方法、及光变性猪术后的活体形态和功能学检测探索改良hESC-RPE细胞悬液视网膜下腔移植的手术方法，在术后利用活体检测方法如检眼镜、视网膜B超、视网膜OCT、fERG、mfERG、等手段观察移植细胞在光诱导视网膜变性猪视网膜下腔的存活、迁移、整合能力和术后猪视网膜功能的变化。结果：1.光诱导广西巴马小型猪视网膜变性模型的建立与鉴定与光照前相比，持续间断光照2-4月龄小型猪3-6月后，视网膜OCT检查可见光变性猪视网膜全层（内界膜Inner Limiting Membrane至RPE层）厚度显着变薄；fERG检测发现光变性猪在暗适应最大混合反应的a、b波振幅和ops波振幅显着下降，明适应反应的b波及p1波振幅也有显着下降；mfERG检测发现光变性猪视条纹区P1波平均振幅密度显着降低。这都提示视网膜结构和功能发生了明显改变。视网膜OCT显示的外核层（Outer nuclear layer，ONL）厚度与离体视网膜石蜡切片HE染色显示的外核层厚度均明显变薄，说明了视网膜感光细胞发生了损伤，活体OCT结果与离体组织检测结果一致；视网膜透射电镜发现感光细胞内节线粒体肿胀、嵴断裂、空泡样变，外节膜盘结构破坏，视网膜色素上皮细胞微绒毛结构破坏，进一步表明视网膜感光细胞发生了损伤，从超微结构层面验证了活体检测方法的准确性。2.光变性猪行hESC-RPE细胞视网膜下腔移植手术、及光变性猪术后的活体形态和功能学检测在本研究中，共对4头光诱导视网膜变性猪探索进行了hESC-RPE细胞悬液视网膜下腔移植术。第1批移植了1头猪，在术后2周行检眼镜和视网膜B超检查示并发性白内障。换用手术显微镜及移植器械、改变手术方法后在第2批移植了3头猪；术后2周行检眼镜、B超检查示无白内障、视网膜脱离等并发症出现；术后1月时的视网膜OCT检查示hESC-RPE细胞进入光变性猪视网膜下腔，移植细胞能够存活，未见排斥反应；术后1月的fERG检查示视网膜整体功能无明显变化；术后1月mfERG检查示0号猪移植区平均振幅密度高于对侧伪手术眼，1号猪移植区平均振幅密度与对侧伪手术眼无明显差异，2号猪移植区平均振幅密度高于对侧未手术眼。结论：1.与光照前相比，可见光光照广西巴马小型猪3个月以上，通过活体形态学检测（OCT）、功能学（fERG、mfERG）检测和离体组织学检测（石蜡切片、透射电镜）发现猪视网膜形态和功能均有显着变化，表明光诱导视网膜变性小型猪模型建立成功。2.构建了活体对大动物进行形态和功能学检测的平台，通过对比活体OCT与离体组织切片对光变性猪进行形态学分析，均提示外核层变薄，说明活体OCT与离体组织学结果一致，利用活体OCT对组织学进行观测具有可靠性；同时发现活体OCT对光变性猪的形态学检测结果与活体fERG和mfERG的功能学检测结果是一致的，表明其具有一定的相关性。3.探索建立了hESC-RPE细胞悬液移植到猪视网膜下腔的手术方法，改进手术设备和方法后的3头猪移植术后早期无并发症发生，安全性较好。4.光诱导视网膜变性猪行hESC-RPE细胞视网膜下腔移植术后1月时,活体形态学检测（OCT）显示移植细胞在变性猪视网膜下腔存活，无明显的排斥反应发生；活体功能学（fERG、mfERG）检测显示hESC-RPE视网膜下腔移植术后早期对猪视网膜整体功能无明显影响，但是在移植区局部有2头猪出现多焦视网膜功能的提高。表明手术对光变性猪视网膜整体功能无明显影响，hESC-RPE细胞移植可能会改善移植区局部视网膜功能。
刘小虎[8]（2013）在《健脾祛瘀法对血脂异常ApoE基因缺失小鼠视网膜色素上皮VEGF/VEGFR2信号通路的影响》文中研究说明目的：通过健脾祛瘀法干预血脂异常ApoE基因缺失（apolipoprotein E-deficient,ApoE-/-）小鼠,探索健脾祛瘀法对血脂异常ApoE-/-小鼠视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）VEGF/VEGFR2信号通路的影响。方法：将2月龄ApoE-/-小鼠随机分为两个大组：普食组和高脂组。普食组再随机分为三组：2月龄普食组（A组）、6月龄普食组（B组）、7月龄普食对照组（D组）；高脂组再随机分为三组：6月龄高脂组（C组）、7月龄高脂对照组（E组）、7月龄中药治疗组（F组）。每组小鼠各12只。A、B、C三组进入实验一（造模）,D、E、F三组造模成功后进入实验二（中药干预）。E、F组于6月龄开始均予普食饲养,F组于6月龄时予中药灌胃干预治疗1月,D组和E组同时间点开始予等量生理盐水灌胃1月。检测所有动物体质量、血脂、血流变指标,RPE层行光镜、免疫组化、透射电镜观察,Western-blot检测视网膜VEGF.VEGFR2的表达。结果：C组小鼠体质量、血脂、血流变指标均显着高于A组和B组（P<0.05）；C组RPE厚度显着低于A组和B组（P<0.05）；C组RPE层VEGF及VEGFR2染色面积、积分光密度均显着高于A组和B组（P<0.05）；C组视网膜VEGF蛋白的相对表达量显着高于A组和B组（P<0.05）。7月龄小鼠E组体质量、血脂、血流变指标均显着高于D组和F组（P<0.05）；E组和F组RPE厚度显着低于D组（P<0.05）,E组与F组之间比较差异不显（P＞0.05）；E组RPE层VEGF及VEGFR2染色面积、积分光密度均显着高于D组和F组（P<0.05）；E组视网膜VEGF蛋白的相对表达量显着高于D组和F组（P<0.05）。结论：1.本实验利用高脂饲料饲养ApoE-/-小鼠成功地建立了增龄性血脂异常小鼠类似AMD（干性）动物模型,该模型有望成为AMD实验研究的优势模型。2.健脾祛瘀法可减缓模型动物RPE细胞损伤,下调RPE层VEGF、VEGFR2表达水平,调控RPE层VEGF/VEGFR2信号转导通路。3.健脾祛瘀法对AMD由干性向湿性发展有一定干预作用。
潘俊如[9]（2013）在《ApoE基因敲除鼠眼底AMD样改变及其与MBD2相关性的初步研究》文中认为【目的】探讨MBD2基因在ApoE-/-小鼠建立的年龄相关性黄斑变性（AMD）模型中的作用及影响。【方法】选择8周龄大小Mbd2-/-ApoE-/-小鼠12只（24只眼）为实验组，ApoE-/-小鼠12只（24只眼）为对照组，经过4个月西方饮食诱导，检测血清总胆固醇水平，取眼球标本行电镜检测，观察玻璃膜超微结构改变，免疫荧光检测视网膜脉络膜细胞间粘附分子-1（ICAM-1）表达。【结果】Mbd2-/-ApoE-/-小鼠与ApoE-/-小鼠总胆固醇水平无统计学差异（P>0.05），电镜显示ApoE-/-小鼠眼底出现类似人AMD样改变，表现为RPE细胞基底部内折紊乱，视网膜下沉积物堆积及玻璃膜增厚现象，并且单敲组较双敲组小鼠玻璃膜厚度明显增厚（P<0.05）。Mbd2-/-ApoE-/-小鼠与ApoE-/-小鼠眼球免疫荧光检测发现单敲组脉络膜ICAM-1表达较双敲组增多。【结论】MBD2基因敲除在ApoE-/-小鼠建立的老年性黄斑变性小鼠模型中可能通过减少脉络膜内皮细胞活化，改善微循环，减少脂质沉积从而减轻AMD的病变发展，对临床治疗AMD提供了新的治疗途径。
谢礼丹[10]（2013）在《健脾祛瘀法对血脂异常ApoE-/-小鼠RPE-Bruch’s膜—脉络膜毛细血管复合体中VEGF/VEGFR2信号通路的影响》文中研究说明目的：探讨健脾祛瘀法对血脂异常ApoE基因缺失小鼠（ApoE-/-）动物模型模型RPE-Bruch’s膜-脉络膜毛细血管复合体（RBCC）中VEGF/VEGFR2信号通路的干预作用。方法：将2月龄ApoE-/-小鼠随机分成造模组和对照组,造模组给予高脂饲料喂养,对照组给予普通饲料喂养,喂养4月,确定模型组造模成功后,将模型组动物随机分为低剂量组（中药低浓度剂量灌胃）、中剂量组（中药中浓度剂量灌胃）、高剂量组（中药高浓度剂量灌胃）及阴性对照组（生理盐水灌胃）,予相应治疗,疗程1月。观察各组小鼠的一般状态、体质量、血脂指标、血液流变学的改变；光学显微镜观察其RBCC组织形态学改变及透射电子显微镜观察其超微结构的改变;免疫组化方法检测其RBCC中血管内皮生长因子（VEGF）及其R2受体（VEGFR2）的表达量,Western-blot检测视网膜VEGF蛋白相对表达量。结果：1.体质量、血脂指标、血液流变学：中剂量组与阴性对照组相比,体质量明显减轻,差异具有统计学意义（P<0.05）; TC、TAG、LDL及血浆粘度及红细胞压积指标显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）；2.视网膜色素上皮（RPE）及Bruch’s膜厚度：低剂量组、中剂量组、高剂量组与阴性对照组RPE相比,厚度变厚不显着,差异无统计学意义（P>0.05）；低剂量组、中剂量组、高剂量组的Bruch’s膜与阴性对照组相比,厚度明显变薄,差异有统计学意义（P<0.05）；3. RBCC由VEGF、VEGFR2及视网膜中VEGF蛋白相对表达量：低剂量组、中剂量组、高剂量组与阴性对照组相比,表达量明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;中剂量组与低剂量组、高剂量组相比,表达量明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：1.7月龄实验性血脂异常ApoE-/-小鼠的病理及生理学改变与早期AMD相似。2.健脾祛瘀中药,特别是中浓度剂量组、高剂量组剂量组一定程度上可改善血脂异常ApoE-/-小鼠RBCC的病理性损害。3.健脾祛瘀中药通过下调血脂异常ApoE-/-小鼠RBCC中VEGF、VEGFR2的表达,对调控VEGF/VEGFR2信号转导通路有重要的影响。
二、Ultrastructural changes in Bruch’s membrane of apolipoprotein E-deficient mice（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Ultrastructural changes in Bruch’s membrane of apolipoprotein E-deficient mice（论文提纲范文）
（1）脉络膜新生血管树鼩模型的建立及其关键信号通路的揭示（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 脉络膜新生血管树鼩模型的建立 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 树鼩脉络膜新生血管不同病程全转录组水平差异分析 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文总结 |
| 创新点 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 脉络膜新生血管动物模型的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）饮食诱导的食蟹猴年龄相关性黄斑变性模型中肠道菌群的失调及其作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 AMD发病的特征 |
| 1.2 国内外的研究动态及发展趋势 |
| 1.3 AMD发生的危险因素 |
| 1.3.1 遗传因素与AMD疾病的关联性 |
| 1.3.2 血脂异常在AMD疾病中的潜在作用 |
| 1.3.3 炎症在视网膜病理改变以及AMD发病过程中的潜在作用 |
| 1.4 组学研究在代谢性疾病中的应用 |
| 1.5 AMD小鼠模型的研究现况 |
| 1.6 饮食-肠-视网膜轴在AMD中的潜在重要性 |
| 1.7 研究意义和内容 |
| 第二章:长期HSHF饮食诱导的AMD食蟹猴模型及其多组学分析 |
| 2.1 仪器和材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 实验试剂与耗材 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 青年与中年食蟹猴长期HSHF饮食诱导模型 |
| 2.2.2 食蟹猴粪便样品采集和DNA提取 |
| 2.2.3 食蟹猴血样采集和血浆生化检测 |
| 2.2.4 静脉血白细胞的搜集 |
| 2.2.5 宏基因组测序与分析 |
| 2.2.6 转录组测序与数据分析 |
| 2.2.7 数据统计及生物信息学分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 长期HSHF饮食导致中年食蟹猴发生干性AMD |
| 2.3.2 青年猴血液生化指标与体重的变化 |
| 2.3.3 中年猴血液生化指标的改变 |
| 2.3.4 AMD食蟹猴外周血白细胞转录水平的改变 |
| 2.3.5 食蟹猴外周血白细胞的基因功能改变 |
| 2.3.6 AMD食蟹猴肠道的差异菌群 |
| 2.3.7 AMD食蟹猴肠道菌群的功能差异 |
| 第三章:使用小鼠模型验证AMD猴粪菌对脂代谢和视网膜的作用 |
| 3.1 仪器和材料 |
| 3.1.1 仪器 |
| 3.1.2 实验试剂与耗材 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 构建老年鼠HSHF饮食合并AMD食蟹猴粪菌移植模型 |
| 3.2.2 构建青年鼠视网膜新生血管合并AMD猴粪菌移植模型 |
| 3.2.3 小鼠样品收集与处理 |
| 3.2.4 石蜡切片与HE染色 |
| 3.2.5 转录组测序与数据分析 |
| 3.2.6 16s r RNA基因的V4 区扩增子测序分析 |
| 3.2.7 数据统计及生物信息学分析 |
| 3.3 老年鼠HSHF饮食合并AMD食蟹猴粪菌移植对视网膜影响的模型 |
| 3.3.1 AMD猴粪菌移植加重HSHF饮食小鼠的血脂异常 |
| 3.3.2 AMD猴粪菌移植加重HSHF饮食小鼠的视网膜转录组改变 |
| 3.3.3 AMD猴粪菌移植对HSHF饮食小鼠的小鼠小肠菌群的改变 |
| 3.4 青年鼠视网膜新生血管合并AMD食蟹猴粪菌移植模型 |
| 3.4.1 粪菌移植对小肠菌群与视网膜新生血管的影响 |
| 第四章:利用细胞模型验证AMD猴血清对免疫和视网膜细胞的潜在作用 |
| 4.1 仪器和材料 |
| 4.1.1 仪器 |
| 4.1.2 实验试剂与耗材 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞培养 |
| 4.2.2 油红O与苏木素染色 |
| 4.2.3 细胞活性检测 |
| 4.2.4 数据统计及生物信息学分析 |
| 4.3 AMD猴血清对外周血单核细胞与视网膜色素上皮细胞的影响 |
| 第五章:讨论 |
| 第六章:主要结论及展望 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 |
（3）香椿叶提取物对高脂饮食所致视网膜损伤机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文词语缩略表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 脂代谢异常所致年龄相关性黄斑变性的研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、致谢 |
| 三、个人简介 |
（4）蛋白组学分析吸烟对ARMS2/HTRA1高危型RPE细胞的影响及优化干细胞系建立（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、吸烟者血清作用于ARMS2/HTRA1 高危型及野生型RPE细胞的i TRAQ蛋白组学分析 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要试剂配制 |
| 1.1.4 主要设备仪器 |
| 1.1.5 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 iPSCs-RPE细胞的形态特征及RPE特异性标志物鉴定 |
| 1.2.2 人原代RPE细胞获得及基因分型 |
| 1.2.3 最佳血清作用浓度为20% |
| 1.2.4 基于iTRAQ蛋白组学分析结果 |
| 1.2.5 差异蛋白验证 |
| 1.2.6 吸烟者血清刺激高危型iPSCs-RPE细胞后吞噬功能增强 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 AMD疾病细胞模型 |
| 1.3.2 高通量蛋白质谱表明吸烟者血清刺激后,高危型和野生型的蛋白表达存在明显差异 |
| 1.3.3 吸烟者血清暴露后高危型RPE细胞的吞噬功能增强 |
| 1.4 小结 |
| 二、HTRA1与Caveolin-1 的关系探索 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 主要设备仪器 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 成功构建HTRA1 过表达慢病毒 |
| 2.2.2 过表达HTRA1后Caveolin-1 蛋白表达上调 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、应用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立高危型及野生型优化干细胞系 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 主要设备仪器 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 RPE细胞移植的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）年龄相关性黄斑变性的动物模型研究进展（论文提纲范文）
| 0引言 |
| 1干性黄斑变性的啮齿动物模型 |
| 1.1补体因子途径 |
| 1.1.1 Cfh-/-小鼠 |
| 1.1.2转基因CFH Y402H小鼠 |
| 1.1.3过表达C3转基因小鼠 |
| 1.1.4 C3a和C5a受体-/- |
| 1.1.5 5XFAD小鼠 |
| 1.2趋化因子 |
| 1.2.1 Ccl2-/-和Ccr2-/-小鼠 |
| 1.2.2 Cx3cr1-/-小鼠 |
| 1.2.3 Ccl2-/-Cx3cr1-/-双基因敲除小鼠 |
| 1.3氧化损伤模型 |
| 1.3.1用羧乙基吡咯加合蛋白进行免疫 |
| 1.3.2血浆铜蓝蛋白/亚铁氧化酶双基因敲除小鼠模型 |
| 1.3.3 SOD1-/-小鼠 |
| 1.3.4 SOD2-/-和 SOD2敲低小鼠 |
| 1.3.5吸烟/氢醌 |
| 1.4脂质/葡萄糖代谢 |
| 1.4.1高血糖指数饮食模型 |
| 1.4.2 ApoE-/-小鼠 |
| 1.4.3 APOEe2/e4转基因小鼠 |
| 1.4.4 APOB100转基因小鼠+高脂肪饮食 |
| 1.4.5 Ldl受体-/- |
| 1.4.6 Vldl受体-/- |
| 1.4.7 CD36-/-小鼠 |
| 1.4.8 Mcd/mcd小鼠 (转基因突变体组织蛋白酶D) |
| 1.5 ARMD的其他啮齿动物模型 |
| 1.5.1快速衰老小鼠 |
| 1.5.2导致黄斑营养不良的单基因突变 |
| 2湿性黄斑变性的啮齿动物模型 |
| 2.1激光诱导CNV |
| 2.2视网膜下注射诱导CNV |
| 2.2.1视网膜下基质胶注射液 |
| 2.2.2视网膜下VEGF基因治疗 |
| 2.2.3视网膜下注射巨噬细胞和脂质过氧化物与聚乙二醇 |
| 3小结 |
（6）Effect of Methyl-CpG Binding Domain Protein 2（MBD2） on AMD-like Lesions in ApoE-Deficient Mice（论文提纲范文）
| 1 MATERIALS AND METHODS |
| 1.1 Experimental Animals |
| 1.2 Determination of Serum Cholesterol |
| 1.3 Tissues Preparation |
| 1.4 Transmission Electron Microscopy |
| 1.5 Immunofluorescence Staining |
| 1.6 Statistical Analysis |
| 2 RESULTS |
| 2.1 Total Serum Cholesterol |
| 2.2 Ultrastructural Changes in BM |
| 2.3 Immunofluorescence Staining for ICAM-1 in both Two Groups |
| 3 DISCUSSION |
| Conflict of Interest Statement |
（7）光诱导视网膜变性猪模型移植治疗中活体鉴定的初步研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 光诱导视网膜变性猪模型的制备及鉴定 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 光诱导视网膜变性猪视网膜下腔细胞移植的初步探索及术后活体形态和功能学检测 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 年龄相关性黄斑变性动物模型研究进展综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（8）健脾祛瘀法对血脂异常ApoE基因缺失小鼠视网膜色素上皮VEGF/VEGFR2信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文略缩词对照表 |
| 1 引言 |
| 2 实验研究 |
| 2.1 实验一：动物模型的建立 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.1.1 实验动物 |
| 2.1.1.2 实验饲料 |
| 2.1.1.3 实验试剂 |
| 2.1.1.4 仪器设备 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.2.1 动物分织 |
| 2.1.2.2 造模方法 |
| 2.1.2.3 技术路线 |
| 2.1.3 观测指标及测试方法 |
| 2.1.3.1 一般状态观察 |
| 2.1.3.2 血液生化指标检测方法 |
| 2.1.3.3 组织形态学观察方法 |
| 2.1.3.4 免疫组织化学染色方法 |
| 2.1.3.5 Western-blot检测方法 |
| 2.1.4 统计方法 |
| 2.1.5 实验结果 |
| 2.1.5.1. 一般观察 |
| 2.1.5.2 各组小鼠体质量变化 |
| 2.1.5.3 各组小鼠血液生化指标的比较 |
| 2.1.5.3.1 血脂指标的比较 |
| 2.1.5.3.2 血液流变学指标的比较 |
| 2.1.5.4 各组小鼠RPE的组织病理及VEGF、VEGFR2蛋白表达变化 |
| 2.1.5.4.1 各组小鼠光镜下Masson三色染色结果比较 |
| 2.1.5.4.2 各组小鼠电镜下超微结构的变化 |
| 2.1.5.4.3 各组小鼠RPE免疫组化法检测的结果比较 |
| 2.1.5.4.4 各组小鼠视网膜VEGF及VEGFR2蛋白检测的结果 |
| 2.2 实验二：健脾祛瘀法对实验性血脂异常APOE基因缺失小鼠视网膜色素上皮VEGF/VEGFR2信号通路影响的研究 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.1.1 实验动物 |
| 2.2.1.2 实验试剂和药品 |
| 2.2.1.3 仪器设备 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.2.3 观测指标及测试方法 |
| 2.2.4 统计方法 |
| 2.2.5 实验结果 |
| 2.2.5.1 一般状态观察 |
| 2.2.5.2 健脾祛瘀配方颗粒对小鼠体质量的影响 |
| 2.2.5.3 健脾祛瘀配方颗粒对小鼠血脂的影响 |
| 2.2.5.4 健脾祛瘀配方颗粒对小鼠血液流变学的影响 |
| 2.2.5.5 健脾祛瘀配方颗粒对小鼠RPE组织病理及VEGF、VEGFR2蛋白表达的影响 |
| 2.2.5.5.1 组织结构形态观察及RPE厚度变化 |
| 2.2.5.5.2 电镜下超微结构的变化 |
| 2.2.5.5.3 RPE免疫组化法检测结果的比较 |
| 2.2.5.5.4 视网膜VEGF及VEGFR2蛋白检测结果的比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 动物模型的评价 |
| 3.1.1 模型动物的选择 |
| 3.1.2 动物模型指标的选择 |
| 3.1.3 动物模型的评价及与AMD相关性的探讨 |
| 3.2 健脾祛瘀法对血脂异常APOE-/-小鼠RPE的影响 |
| 3.2.1 祖国医学对增龄性改变、血脂异常与AMD病机的认识 |
| 3.2.2 实验组方及依据 |
| 3.2.3 健脾祛瘀法对本实验动物模型作用机制的探讨 |
| 3.2.3.1 降低血脂水平、改善血液高粘滞状态 |
| 3.2.3.2 减缓RPE细胞损伤 |
| 3.2.3.3 下调RPE层VEGF、VEGFR2表达水平,调控VEGF/VEGFR2信号转导通路 |
| 3.2.4 本实验中需要说明的问题 |
| 3.2.4.1 动物死亡原因分析 |
| 3.2.4.2 Western-blot法未检测到VEGFR2蛋白表达量的可能原因 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附表 |
（9）ApoE基因敲除鼠眼底AMD样改变及其与MBD2相关性的初步研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）健脾祛瘀法对血脂异常ApoE-/-小鼠RPE-Bruch’s膜—脉络膜毛细血管复合体中VEGF/VEGFR2信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语 |
| 1 引言 |
| 2 实验研究 |
| 2.1 动物模型的建立 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 饲养条件 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.1.5 造模与分组 |
| 2.2 给药方法 |
| 2.2.1 各组小鼠喂养流程 |
| 2.3 观测指标及测试方法 |
| 2.3.1 一般状态观察 |
| 2.3.2 血液生化指标检测 |
| 2.3.3 组织形态学观察 |
| 2.3.3.1 光镜标本的制备及观测 |
| 2.3.3.2 电镜标本的制备及观测 |
| 2.3.4 免疫组织化学染色检测RBCC中VEGF、VEGFR2表达 |
| 2.3.5 WESTERN-BLOT检测视网膜VEGF蛋白相对表达 |
| 2.4 统计学分析 |
| 2.5 实验结果 |
| 2.5.1 一般情况 |
| 2.5.1.1 造模前(2月龄)情况 |
| 2.5.1.2 各组小鼠6月龄情况 |
| 2.5.1.3 各组小鼠7月龄情况 |
| 2.5.2 体质量变化比较 |
| 2.5.3 生化指标比较 |
| 2.5.3.1 血脂指标比较 |
| 2.5.3.2 血液流变学指标比较 |
| 2.5.4 视网膜色素上皮(RPE)及Bruch's膜(BM)厚度比较 |
| 2.5.5 免疫组织化学染色检测RBCC中VEGF、VEGFR2结果比较 |
| 2.5.6 Western-blot检测视网膜VEGF蛋白相对表达量对比 |
| 2.5.7 透射电镜下RBCC的超微结构的变化 |
| 2.5.7.1 RPE的变化 |
| 2.5.7.2 BM的变化 |
| 2.5.7.3 CC的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 动物模型的选择 |
| 3.2 理论依据 |
| 3.2.1 中医理论依据 |
| 3.2.1.1 祖国医学对痰瘀与AMD关系的认识 |
| 3.2.1.2 中医学者对AMD的新认识 |
| 3.2.2 西医理论依据 |
| 3.2.2.1 ApoE-/-小鼠与血脂异常之间的关系 |
| 3.2.2.2 ApoE-/-小鼠与AMD之间的关系 |
| 3.3 血脂异常影响AMD发病机制分析 |
| 3.4 RBCC的解剖结构及生理功能分析 |
| 3.5 VEGF/VEGFR2在AMD中的作用分析 |
| 3.6 健脾祛瘀法组方依据及方药分析 |
| 3.6.1 组方理论依据 |
| 3.6.2 具体中药分析 |
| 3.7 健脾祛瘀法作用机制探讨 |
| 3.7.1 改善脂代谢紊乱、脉络膜毛细血管动力学异常 |
| 3.7.1.1 在防治动脉粥样硬化和高血脂症方面 |
| 3.7.1.2 在改善血流变方面 |
| 3.7.2 延缓RPE—Bruch's膜—脉络膜毛细血管复合体病变的发生 |
| 3.7.3 下调RBCC上VEGF、VEGFR2的表达 |
| 4 实验相关问题及展望 |
| 4.1 关于实验动物情况说明 |
| 4.2 关于WESTERN-BLOT未检测视网膜VEGFR2蛋白相对表达量情况的分析 |
| 4.3 关于通过光镜、透射电镜法未观测到脉络膜新生血管形成的原因分析 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附表 |
四、Ultrastructural changes in Bruch’s membrane of apolipoprotein E-deficient mice（论文参考文献）
- [1]脉络膜新生血管树鼩模型的建立及其关键信号通路的揭示[D]. 邱丹丹. 昆明医科大学, 2021(01)
- [2]饮食诱导的食蟹猴年龄相关性黄斑变性模型中肠道菌群的失调及其作用的研究[D]. 魏志远. 江南大学, 2020(01)
- [3]香椿叶提取物对高脂饮食所致视网膜损伤机制研究[D]. 杜益茗. 锦州医科大学, 2020(05)
- [4]蛋白组学分析吸烟对ARMS2/HTRA1高危型RPE细胞的影响及优化干细胞系建立[D]. 蔡斌翠. 天津医科大学, 2019
- [5]年龄相关性黄斑变性的动物模型研究进展[J]. 王彤淼,秦波. 国际眼科杂志, 2019(04)
- [6]Effect of Methyl-CpG Binding Domain Protein 2（MBD2） on AMD-like Lesions in ApoE-Deficient Mice[J]. 潘俊如,王琛,余其林,张述,李斌,胡军. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）, 2014(03)
- [7]光诱导视网膜变性猪模型移植治疗中活体鉴定的初步研究[D]. 刘俊. 第三军医大学, 2014(02)
- [8]健脾祛瘀法对血脂异常ApoE基因缺失小鼠视网膜色素上皮VEGF/VEGFR2信号通路的影响[D]. 刘小虎. 成都中医药大学, 2013(06)
- [9]ApoE基因敲除鼠眼底AMD样改变及其与MBD2相关性的初步研究[D]. 潘俊如. 华中科技大学, 2013(07)
- [10]健脾祛瘀法对血脂异常ApoE-/-小鼠RPE-Bruch’s膜—脉络膜毛细血管复合体中VEGF/VEGFR2信号通路的影响[D]. 谢礼丹. 成都中医药大学, 2013(06)